求助我最近在6孔板接种的ES细胞（500个/孔），

是鸟就要去飞

# ~# k7 W: ?: z
, n2 [, X9 k: t( f2 L+ h我最近在6孔板接种的ES细胞（500个/孔），为么长出来有克隆形态，但是都有点扁呢？

是鸟就要去飞

maozhuxiwo1 发表于 2011-5-13 15:13 : P8 k3 H# j, `$ W6 d. e/ |0 S* R' I
回复 是鸟就要去飞 的帖子
/ z8 O% U" v) r) C6 B" O7 ?5 }# L
" y8 q* `7 Y" Y% z你这个是hES吗?    MEF 确实不正常,但不知道你用的什么品种?    还有也许是刚传 ...

% w7 A; R2 [; v' w# A8 F! R谢谢，我用的是mES,滋养层是SNL，已经养了7天了

maozhuxiwo1

回复 是鸟就要去飞 的帖子
2 P3 l! i. H2 L4 H& H% K7 t2 p$ b" y$ D  y0 K' }7 p: ^( ]( P
你这个是hES吗?    MEF 确实不正常,但不知道你用的什么品种?    还有也许是刚传代,等3~4天再观察试试.

是鸟就要去飞

sheepthief 发表于 2011-5-10 15:03 6 m4 X) O' B3 o4 h& M/ [
回复 是鸟就要去飞 的帖子" v& p! }- M4 T7 U3 n% L
7 A6 M! E/ h' Z' l/ g/ u
请问您500个/孔是如何计数的呢？我一直觉得会有饲养层细胞的混杂啊，谢谢

' F. J# X% J" `: O# Y) T9 F
如果你真的分辨不出滋养层和ES细胞的话，可以做差速贴壁（利用ES和feeder的贴壁时间不同）后再计数。我是从细胞液中看细胞大小判断的，ES直径大约10μm，而滋养侧细胞的直径就大的多了，当然这个可能也是有点误差

sheepthief

回复 是鸟就要去飞 的帖子
- a, ~" C' ^. x
7 B9 }! ^8 F6 ?" F: G请问您500个/孔是如何计数的呢？我一直觉得会有饲养层细胞的混杂啊，谢谢

是鸟就要去飞

是鸟就要去飞 发表于 2011-5-10 14:25
& v0 i. C$ {1 }) U( h& @2 B是的，高倍镜下观察背景有好多的黑点，不知则么回事

7 k" |0 H8 m  t7 `/ v* l7 L& C我的滋养层生长在培养皿中时间有点久，已经11天了，这可能是一个原因之一吧

是鸟就要去飞

sdjjfangfang 发表于 2011-5-6 17:46
. p# a4 v) A% q! ^; D- W3 x不过，好像MEF的状态不是很好。但是看着形态还可以，至少边界清晰，形状规则。恩，有一个小问题，就是细胞好 ...

1 L$ x: S4 B0 X$ Z7 C. N5 X3 R是的，高倍镜下观察背景有好多的黑点，不知则么回事

sdjjfangfang

不过，好像MEF的状态不是很好。但是看着形态还可以，至少边界清晰，形状规则。恩，有一个小问题，就是细胞好像有些发黑了。

是鸟就要去飞

nculsa747 发表于 2011-5-5 12:33
/ I1 B, B  D3 k$ o- m回复 是鸟就要去飞 的帖子
+ p0 U9 V* b- k( o) k4 x& _4 t: X4 N
放心，没有问题！估计你在传代时消化的时间久了，或者是吹打的太小了。

& r/ A* v& C! c! u) f& h
谢谢，总觉得瘪，而且在显微镜底下看形态是不好，呵呵

nculsa747

回复 是鸟就要去飞 的帖子+ r9 g( F, `/ Z4 n8 e) D

* Q2 G7 \/ H$ V) S放心，没有问题！估计你在传代时消化的时间久了，或者是吹打的太小了。