免疫组化怎样选择一抗二抗？

asiar

请问免疫组化怎样选择一抗二抗？有什么需要注意的地方？

jhu132llh

简单
$ S- _' \& s/ I, b3 }6 K一抗选BB动物抗你的目的动物AA的目的基因的抗体+ I8 e% G" b, ?' D
如小鼠抗人XX基因/ z2 X9 b4 |: i
二抗就选4 a# j/ h0 z/ w8 s0 Y( B4 ^3 r* D
CC动物抗BB动物的二抗
7 ^' F* ~$ P% F! R, }如上面的一抗而言就兔呀山羊呀驴呀牛呀什么只要不是小鼠抗小鼠的就行了/ }7 {/ {: _% H; k
要是有荧光显微镜的话可以选二抗偶联荧光报告基因# ~0 E* S7 m; @, \" X
要是想做免疫组化的话就选二抗偶联酶然后做酶的第五显色+ h0 j8 I/ Z- o  n  r
, r9 q, I6 J- z  F: k
PS：封闭血清最好用二抗来源动物的封闭血清9 I+ R: c: P" e8 I: x7 R
如二抗选的兔抗小鼠，封闭时最好选用兔封闭血清
: V* L; i- ]& C* Y% v8 u可以有效减少非特异性染色

zhangyan813

首先，要在文献上看一下，你想做免疫组化的抗体现在有没有卖，以前有没有人做过这个方面的免疫组化，如果有的话，就直接用他用的那个一抗就好了。比如说你想做OCT4的免疫组化，就买抗你所用物种的单抗或者多抗，单抗一般是小鼠的，多抗有兔的。
# F% d1 M- _# ~: [其次，决定好一抗，就根据一抗决定二抗。一抗要是小鼠，二抗就要买山羊抗小鼠或者兔抗小鼠之类的，此外，还要查一下这个二抗欧联的荧光蛋白的波长，你实验室所用荧光显微镜能不能用，这个很重要。一般二抗用国产的就行，便宜好用，我们实验室多用博世得的产品，很好用。
; {, e5 e" W+ j* Z6 I' B  W" H+ i( d0 q然后，买回来的抗体，最好分装使用，分成30微升一管，可以用很久。二抗一定要注意避光保存。
- H) M) y8 r8 Q8 E; U3 x0 o2 r$ \& T; p另外，博世得还卖一种叫免疫荧光笔的东东也很好用，这个做免疫组化是不能缺少的。

hualin840518

这要看什么抗体了  y9 {+ W* c: b) q5 O
有的抗体可以通用的
: c- x! S) H/ m8 U( w( H; Z, @比如大动物(牛,猪)有些是买不到抗体的" i! H) ^: p. y( w5 \
但可以用小鼠用的抗体!