求助大鼠BMSC的培养器皿

759512199

各位大虾，大鼠BMSC的培养用的是塑料的还是玻璃的？' ~1 L, d3 X+ Y2 D0 a" o
我用塑料的养了半个月貌似都分化了，肿么回事，培养基用的是低糖DMEM，10%FBS，1%P/S，1%L/g

若兰汀

我养的大鼠MSC用的是BD公司的塑料培养瓶，除了没添加L/G之外，其他都和你一样。其实大鼠是不需要添加L/G的。长期在含糖的有血清的培养基中培养确实会使其分化，但是10天应该没问题的。

759512199

回复 若兰汀 的帖子0 h% `9 M" o8 e; g6 S3 Y: K' y" w

4 I4 i1 y' w5 p- t你的细胞养了几代啊？我的原代还行，P1，P2就好像分化了，大概20天左右。我养的羊水干细胞也加L/g，长得蛮好的，是不是大鼠MSC不能加L/g？

xiao6tao

MSC一般都市用塑料培养皿，不能用玻璃的好像影响贴壁，我以前养的也是容易分化，我发现每次不能等到长的太满再去传代，传代的时候密度不要过大。因为没有经验我每次传代都比较密，后来发现确实很容易分化并且容易衰老

759512199

回复 xiao6tao 的帖子
. t4 u# I5 q  s3 l/ J( h
9 S6 I5 C4 V7 \* s7 B# s谢谢大侠。那你一只大鼠原代是分几个皿呢？

xiao6tao

回复 759512199 的帖子
' \1 F; S; r8 t/ X& b# W) g  T$ o1 t0 D& A
看生长情况，我做过三次元代，第一次是1：1因为取得时候细胞数量很少或者其他原因，十来天长得少，就给传了，第二次同样少。第三次，发现细胞数量比较多，中间第三天换液后，过了三天就长了很多，就1：2传代的。

759512199

回复 xiao6tao 的帖子7 Z" `) e& _" E8 X# w; |
7 n; `+ e3 p2 M4 h7 l( k( q8 I! s
你原代的细胞密度怎么样？我取了大鼠腿骨和臂骨的MSC，分了两个皿，发现血细胞非常多，血细胞多了是不是会影响MSC的贴壁率啊？

xiao6tao

依据个人熟练程度和动物，元代取得密度都不同。一般情况下，元代我喜欢种到一个皿，因为这个东西喜欢凑热闹。正常骨髓环境中有血细胞的存在，这也是他适宜的生长微环境。所以不要担心有多大的影响。只是会耗费一些营养物质。后来为了纯化MSC所以要换液和离心去掉血细胞。