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加双抗的问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-5-6 00:57 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
现在传代培养的细胞需不需要加双抗,看到有些人要加,有些人又说不加,但是我的细胞已经传了好几代,一直加双抗,如果后期培养不加双抗可以吗?(假如是脐带MSCs)
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沙发
发表于 2011-5-6 01:22 |只看该作者
双抗是不一定要加的。& e! e; A1 Q# {7 J; y
因为加双抗的目的是为了防止污染,如果操作技术和实验条件没有问题,不加双抗也是OK的,关键是无菌操作!
/ P* J" o4 ?; R1 F  b3 @" t1 _9 Q我的是BMSCs,一般在原代培养的时候,污染机率相对较高,有加双抗,传代后的细胞培养就不加双抗了。7 t& g' Q( o; x8 d
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藤椅
发表于 2011-5-6 07:58 |只看该作者
经常有人提到在做转染的时候要换用不含双抗的培养基,双抗对转染有影响吗?(借用一下楼主的地方,呵呵)
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板凳
发表于 2011-5-6 08:13 |只看该作者
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回复 sheepthief 的帖子. j8 [( `- e0 ~) l

! K$ P( ?5 x* S1 t4 E  f) k有影响的
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报纸
发表于 2011-5-6 08:14 |只看该作者
回复 哇牛 的帖子. ]( p5 Q, l, m

* o5 O# l! W4 f. X& d如果你一直添加,那就还是添加吧
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地板
发表于 2011-5-6 09:42 |只看该作者
这要看你实验室环境和细胞的状态,有的实验室可能都要加,本身有污染就要加,而一旦加了,最好就持续一段时间。如果实验室环境基本没有污染的情况,细胞状态也很好,就最好别加了,个人觉得  是药三分毒啊
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发表于 2011-5-6 09:47 |只看该作者
双抗肯定是要加的,一般双抗单独配制,在使用时按比例添加到培养液中比较好,而不要直接在配制培养液时就加入,因为双抗一直在4°冰箱保存会失效。但是在特殊情况下是不能加双抗的,比如有的脂质体转染试剂盒,它的说明书中就会要求提前一天更换没有双抗的培养液。一般在培养过程中如果没有特殊说明还是添加双抗比较好。
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发表于 2011-5-6 10:46 |只看该作者
看样子是非加不可了,实验室环境不是很好,不加可能增加污染的几率。
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发表于 2011-5-6 11:21 |只看该作者
双抗还是有作用的,污染很头疼的。
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发表于 2011-5-6 11:24 |只看该作者
加了双抗会影响细胞活力和状态吧
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