细胞冻存时4度放置一会儿出现液相分离

wxl87

不知道大家，发现没有。细胞冻存时，把细胞4度放置一会儿出现液相分离。大家有没有留意过？这样对细胞有什么影响？

wxl87

谢谢各位的解答！

joesiezhao

DMSO在16°c以下是结晶的，因此冷冻保护剂要DMSO和大分子的试剂混合使用，同时加入冷冻保护剂后应尽快放入-80冰箱或程控降温，以免液相析出。

gaorongbest

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0 k- O- N% {' _3 P1 j还是不要在4度放超过半小时，DMSO对细胞有毒，如果有冻存盒的话，直接放里面，再放到-80度，次日放液氮就行了。

hehe100

我们一般也不放置在4度，直接把冻存管包上棉花放置-80度一天后，放入液氮罐保存。

songzxj

回复 wxl87 的帖子. |$ ^5 F; q' N; Q1 ?* t" \
8 L! f/ W! R$ Q8 `( r2 }
你可以配好冻存液放在室温，两三个小时没有问题的。

zhenhuale

DMSO没有这么容易析出来的，建议采用程序降温盒，直接放在-80℃。

wxl87

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; G5 N5 P2 _/ |+ b" ]是这样的, 因为我要操作很多细胞的冻存,所以最初做好的一批现在4度存放,等我做完所有的我在放入-80冰箱中.所以就出现了前面说的分液相的情况,现在想想,可能是操作时间长了,DMSO又吸出来了吧.

starlancer

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是dmso析出来了吧。是不是没有混匀导致的？这个还真没仔细看过，每次在四度放置之后就直接放入-20度冰箱了。

songzxj

DMSO在低温下会结冰的，还是现用现配，很方便的