请教一下，大家做转基因的怎么来挑取克隆细胞？

wnavy200299

深海寂寞鱼 发表于 2011-5-17 09:40 2 H4 t  _& F1 X; R- H; n$ B- s1 e
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  to 生物化学zy：

' u- ]: |! [1 _0 b6 x" z( M关于克隆环，说了半天，还是整张图片看看，比较直观。
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+ z& M# s6 J+ O/ h5 F% V! J! z至于挑克隆的方法，生物化学zy 已经说过了，4 T0 V5 x& A( ?0 T
在此就不诉说了。但要注意消化时间，长了克隆就有可能养不起来。" H. P- B& X5 K% Y
前两天刚挑了几个克隆细胞，感觉有几个不太好。7 C( m  B' _8 H
再就是老生常谈的问题：注意污染！！！！
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* n! n! F3 e) _+ e/ O$ ^! qok！; f9 H6 d' F; e$ y% t' ^! v

wnavy200299

更正“长了克隆就有可能养不起来。”  }# J4 Y; a4 o& b! ^1 k
挑了的克隆就有可能养不起来。”! ]6 u8 N0 T, x% T6 N

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wnavy200299

不管用什么克隆环（玻璃瓶口环、大枪头粗短截断部分等），基本意思和思想是一致的。
' q6 c$ y( B! Y3 i' `8 W% D转染一般用6cm板，转然后（12h后）分板，一般分板比例为1:10~12（1个6cm板分到10~12个6孔板），分板时不加药，次日换液开始加筛选培养液。一般10天左右出现克隆。挑克隆至24孔板培养。ok~

wnavy200299

生物化学zy 发表于 2011-5-18 17:08 - F% a7 }2 d# w: C
顺便说一下,wnavy200299 是我师兄,哈哈

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哈哈，共同为干细胞论坛添砖加瓦~~~