请教一下，大家做转基因的怎么来挑取克隆细胞？

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我们实验室,是用自己做的克隆环(就是自己用那个口服液的小瓶的瓶环,用钳子掰下来,干热160度2h灭菌),用镊子夹着放在克隆上,刚好把克隆套上,之后不要移动克隆环,然后滴加少许胰酶消化,最后加含血清培养液终止即可.其实克隆环就是起着将克隆固定的作用.很好用的.

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, M3 M- P9 @0 ^4 y3 c8 Q3 g# U就是那种口服液的瓶颈的部位.拿下来之后就是一个环.挑克隆时将其轻轻的放在克隆上,一般的经验是那个大小刚好把克隆套住,放在上面就行,不要再动,之后加酶就行,整个过程不要再动克隆环,以免细胞丢失.

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回复 深海寂寞鱼 的帖子7 V+ e- F) q" b' V$ d( }
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是玻璃的那部分.自制的一个一个环,然后全部清洗,晾干.装在小烧杯中,包好,160度2h灭菌.
/ H/ u6 m# R3 b5 r( O保存.  你挑克隆的时候可以在显微镜下用marker把克隆标出来,就是画个圆圈,标出位置,用镊子夹住克隆环,轻轻的放在那个圈上,不用密封.轻轻的加入胰酶,消化就行,就是整个过程中不要让克隆环移动就行.

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  b  r+ ]$ |- S6 `+ p* Y3 i' Z就是像葡萄糖口服液那么大的瓶,医院应该有很多,那瓶不是圆柱型嘛.到脖颈那个地方就细一点,这样说吧,瓶口为a,瓶颈为b,瓶身为c,去掉c,保留a与b,就是尽量保留b,因为到时候那个留下的瓶颈的高度会影响你加胰酶的体积,
: U( E- k5 v+ F具体做法:将这个瓶用纱布完全包上,左手捏住瓶口部位,用钳子在瓶颈稍微向下一点,使劲一敲.就会将瓶子的身子去掉.注意小心玻璃渣.完事后可以把不平的地方用砂轮磨一下就行.

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就是像葡萄糖口服液那么大的瓶,医院应该有很多,那瓶不是圆柱型嘛.到脖颈那个地方就细一点,这样说吧,瓶口为a,瓶颈为b,瓶身为c,去掉c,保留a与b,就是尽量保留b,因为到时候那个留下的瓶颈的高度会影响你加胰酶的体积,
( L# r9 H( C/ C) U' J0 C2 f具体做法:将这个瓶用纱布完全包上,左手捏住瓶口部位,用钳子在瓶颈稍微向下一点,使劲一敲.就会将瓶子的身子去掉.注意小心玻璃渣.完事后可以把不平的地方用砂轮磨一下就行.

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顺便说一下,wnavy200299 是我师兄,哈哈