MSC细胞复苏后不贴壁原因？

pauldong

       请各位大侠帮帮忙，分析下原因，MSC细胞复苏后用培养基保存运输了8小时，接种后细胞贴壁状态极差，大部分细胞仍然悬浮，极个别贴壁细胞状态也较差，很难增殖。

呆呆鱼

先养个一天看看情况，不行的话离心全量换液一次，看看有没有好转

luoziwei

图？

killua

接种后几天细胞贴壁状态极差呢

pauldong

接种密度挺高，4*106/T175,接种后12小时观察的，已经全量换液了，至24小时观察时贴壁稍微多了一点，但是不像正常培养的细胞那样的顺利，是不是复苏后的细胞悬浮保存时间太长，我看资料说贴壁生长的细胞悬浮状态下不能生长并且会逐渐退变，可能是细胞表面的粘连蛋白丢失还是什么原因，具体悬浮保存多久时间会出现退变也不了解

jxydiandian

细胞复苏后本来就很脆弱，需要贴壁筛选掉一部分死细胞，你复苏后让它颠簸了8个小时也确实难为它了，只能慢慢等他贴壁长起来了，你提高培养基中血清的浓度试试看呢？比如20%

always_wp

大鼠，小鼠哇？4 F; Y# _& Q* j: q' J- |

如来的观音

首先建议上图，还有是什么来源的MSC，用什么培养基？

jiojoo

pauldong 发表于 2011-5-18 20:21 . {  @# G, p+ U8 }# o1 a
接种密度挺高，4*106/T175,接种后12小时观察的，已经全量换液了，至24小时观察时贴壁稍微多了一点，但是不像 ...

/ ^5 O0 f' C. v+ Z1 {- |, U, Y8 D复苏后你没有培养就直接悬浮放了8h吗？6 c% g. G$ \0 u! ^1 |  @/ x+ }
DMSO毒性很大的，你这样放的话细胞很快就会死的
+ z/ E( }+ a6 c+ d) c: ~' P应该是复苏后培养一段时间等细胞贴壁后再全量换液，然后再运输

realinter

回复 pauldong 的帖子
' P- U" w! M, i0 p: F  O# s  e) h5 }- Q/ ]1 G
可能是冻存的时候出问题了。