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求助大鼠BMSC原代培养问题   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-5-19 13:05 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
各位大侠,大鼠BMSC的原代培养会产生克隆样的生长,大家是继续养还是传代啊?继续养会不会长老了,传代会不会太稀了?
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沙发
发表于 2011-5-19 13:27 |只看该作者
BMSC本身就是克隆样生长的啊,骨髓中MSCs占有的比例是十万分之一左右。按10的七次方的细胞密度种植也就百来个细胞,最后都是一个一个克隆增殖出来的啊。
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藤椅
发表于 2011-5-19 19:09 |只看该作者
回复 babyzeng 的帖子! b# V5 [. o5 [7 L/ W
" i0 X5 u9 A0 B: m  r* K" V4 N
那你是一直培养直到长满整个瓶,还是一星期左右传代?
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板凳
发表于 2011-5-19 20:13 |只看该作者
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不要等到长满,大约50~60%就该传代了。
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报纸
发表于 2011-5-20 08:59 |只看该作者
建议不要长满,克隆中间细胞稍密集就可以传代了,我习惯是这样7 d/ `: h" H  j5 ^0 z* M
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地板
发表于 2011-5-28 22:47 |只看该作者
我们实验室老师要求长到85%才传代,建议传代时不要用离心法,那样对细胞伤害太大,导致传代后细胞生长慢。我已经吃过亏了。
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发表于 2011-6-2 13:22 |只看该作者
回复 taxuewuge 的帖子
- m& m+ q4 s' j- v9 |9 t% \, w: p* T% A2 Z
不用离心法那应该用什么方法呢,因为我估计过两天细胞长出来也要传代了,急求!谢谢了
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发表于 2011-6-2 17:54 |只看该作者
倒掉培养基,用D-Hank's洗三遍,加3ml胰酶,待细胞80%变圆后,加5ml培养基将变圆的细胞吹打下来,然后分装成两瓶,第二天全换液
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发表于 2011-6-2 22:13 |只看该作者
好的,今天看了一下细胞,还是没有长成一片啊,都是小范围的发展,好像各自为政似的。心里很是着急啊,我这两天换液的时候都是用pbs一直冲它,希望把瓶底的杂质吹干净可效果还是不怎么的。不知道什么时候能长成气候,别等到细胞都衰老了都不能传代。自我认为还是第一次半量换液的时间有点长了,搞得那些不是干细胞的杂细胞也给贴壁了现在就很难冲下来了
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帅哥研究员 优秀会员

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发表于 2011-6-3 01:15 |只看该作者
80%融合即可传代
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