关于细胞培养

丁子

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在细胞培养的过程中，细胞的状态开始变得不好，想去掉不好（比如细胞老化，生长不好）的这部分细胞，留下状态比较好的细胞继续培养或传代，请问大家遇到有过这种情况吗？想请教大家又是怎么做的呢

和泽村

首先将细胞贴壁培养，培养一段时间后，就同大家说的一样，进行换液培养，将未贴壁的死细胞和旧培养液一起倒掉，加入新鲜培养基就可以了。细胞形态不好，可能是本身细胞就有问题，个体差异性；外部因素的话，培养箱的设定是否符合培养的条件，如温度、湿度、浓度；培养箱的水要及时更换及添加，并定期消毒。还有就是培养液的问题，是否过期，是否污染了，最好用现配的培养液去培养细胞。如果你想去掉不好（比如细胞老化，生长不好）的这部分细胞，留下状态比较好的细胞继续培养或传代，你可以先换液，然后离心，最后分管，再镜下观察，留存形态较好的细胞。

genedu

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您说的这种情况下，你可以试试胶原酶，控制一下消化时间，就可以使两种不同贴壁程度的克隆分离开来

肉丁

贴壁细胞状态不好时，贴壁并不紧，状态好的细胞贴壁会比较牢，个人建议可以采取轻吹的方法，当然这个力度要掌握好，如果怕浪费细胞，可以吹下的细胞再次进行低速离心，重新打回原瓶或在新瓶中培养，可以试一试

genedu

对于你提出的是贴壁克隆，最简单的方法就是再挑取一次，再传代即可；如果是不好的克隆比较少，那就直接把不好的克隆挑取出来，扔掉。剩下的继续传代

丁子

回复 lifeida 的帖子9 @9 h; S; O  ^& J

4 `# o; i  h/ U) u. T这个看起来有点麻烦了，我试试看

丁子

回复 yangpan521 的帖子+ Z$ A1 J6 k1 E% \# Y
  o) d# }' k. f
恩，看来我需要做更多的了解才能提出问题了，谢谢

丁子

回复 张也行 的帖子
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0 ?+ S4 ~9 C% i& t哦，好的

张也行

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' P" x( t6 U; U* H4 I; I) j9 q* b1 n/ _你要是有限传代的正常细胞的话老化是一个正常现象，与其想除去不好的细胞还不如找一些好的细胞来做。你在除去不好的细胞的时候，那些好的细胞也早被你折腾死了。

丁子

回复 zhusealin 的帖子
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& ?9 B" L; F$ L能介绍一下具体的步骤吗？网上也查到有这种做法，但是具体操作是怎么样的没查到