关于小鼠胚胎干细胞培养

chliu

在培养胚胎干细胞的时候，为了防止其分化，传代时需要将细胞打的很散，然后稀释。请问大家都是用什么方法将其打的很散的呢？

chliu

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我们用0.25%的胰酶处理20分钟，培养基终止，用吸管抵住培养皿的底部使细胞挤出来，反复很多次，结果传代后的细胞还是长3-4天左右便有个别地方clumps出来，长得还是不是很平，不知是什么原因呢？是没打散么，可是我们胰酶处理的时间已经够长的了，挤得也很厉害了