求卵巢颗粒细胞生物学特性

lianzhimin

小的想培养一些颗粒细胞，但是小鼠的卵泡太小，在体视镜下做了一次穿刺法取颗粒细胞，像伸长脖子的鸭一样在镜下花了一个小时刺穿卵泡，结果卵巢面目全非，香消玉损，而我的鸭脖脑袋已经变成刚探头的乌龟样，颈项僵硬，两眼无神，一脸无奈与失落，哎！什么也没得到。自知是自己技术问题，但还是想问问有没有其他分离方法？比如通过消化贴壁差速，或者传代消化差时的方法等。求各路英雄好汉指教一二！！！

monk125

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yangpan521

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+ P: \* G# d* [* C6 R; a
你好，你是在做分化吗？请问你说的卵丘细胞与干细胞共培养是怎样操作的？

yangpan521

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6 ~: O, Y# s" b7 ~9 z9 H8 ]+ i2 @
# [: r0 m  J3 Z. Z$ e/ h请问你是在做干细胞诱导卵分化吗?

lianzhimin

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2 R1 F$ j4 y& |3 I+ H% ~9 F
" f% Q9 Q! ?; d0 ?多谢哥哥相助！

moluxingke

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/ z( o- f; G# b( l7 z( ~2 r嗯 这个我还不太了解，不好意思。$ [* ?9 U# G* Q* s3 B
如果不穿刺，我觉得很容易有其他细胞污染，毕竟卵巢里面还有膜细胞、基质细胞、表皮细胞等成分。如果是细胞死亡的太多，你可以在培养基里面穿刺然后收集，如果比较熟练的话速度够快，应该没有问题的。

细胞海洋

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lianzhimin

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) w# c9 o! @- E2 T
4 p- \& [! L# m) W, @& t; B5 G我想拿颗粒细胞和胚胎干细胞共培养，看诱导效果。你说的方法我在外文的一篇文献中见过，可行性差，细胞和我都快被折腾死了，收到的量少，且易污染，有没有不刺穿的方法分离？. t2 P* H) M# U) w

moluxingke

你对需要的颗粒细胞有什么要求吗？卵巢是比较小，如果要求不是非常严格的话，可以对小鼠先进行激素处理，如对21d左右的雌鼠注射PMSG 46-48h后再取出小鼠卵巢，这时候许多卵泡变的非常大，在镜下刺起来就比较容易一些，然后挑选那些带颗粒细胞的卵母细胞，可以酶消化处理，也可培养一段时间，然后用枪头吹打，颗粒细胞就会被吹散，你除去卵母细胞，剩下的就是颗粒细胞了，严格来说大多是卵丘颗粒细胞。

aulenuyah

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这个还真不好说，要手感的，语言无法形容，呵呵。少折腾细胞吧