我的一个思路，请问这样行不行

临床干细胞

想知道一个干细胞对某种疾病是不是有效果，打入干细胞入这种动物模型，如果有了效果，想知道效果是否来自于干细胞分化出来的新细胞，所以想了个办法- o; ]# j1 k3 }3 G
就是，动物模型的老鼠是母的，打入的干细胞来自于公鼠，打入干细胞之后，测新生细胞的染色体，如果是xy的，就说明是来自于干细胞，你说这样行吗？ " R; _; Q* r5 J& Y7 }' O

临床干细胞

dxb1985 发表于 2011-6-9 10:31 % W6 v7 K  D4 U6 F( \  p9 V
回复 临床干细胞 的帖子& p# W, Y+ ?. f- K

, d7 M. P( }5 W  K为什么不用细胞膜标记物（如pkh26等），能跟踪细胞是否定位到损伤部位，还比较方便 ...

3 s' A3 L0 }) t: R! H太感谢了

dxb1985

回复 临床干细胞 的帖子: o6 g- o) Y6 ?2 j( b# q, n/ Y

6 }& r6 ~( G! h( A为什么不用细胞膜标记物（如pkh26等），能跟踪细胞是否定位到损伤部位，还比较方便，做个免疫组化就行了。其实还可以纳米材料标记，给你一篇文章，是做人的神经干细胞治疗的。
+ n, s6 l' `  W

kittybruce

张也行 发表于 2011-6-1 21:40 0 N! [! @  I: H6 J& @+ E- q8 ^
也可以对注入的干细胞提前导入荧光蛋白等标记，这样就可以通过切片分析是不是你的干细胞发挥作用了。
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6 u4 Y7 p$ P! {+ F/ u- `- r我 ...

3 J* U% M6 I* [6 c) ?* y
"我有一点不太明白，把一只动物的细胞注入到另一只动物难道就没有免疫排斥吗？"
/ E) V% `( f# A% J- {/ [5 {
; \( A3 h: Y; u3 k' A$ i+ v" N7 v' E这个问题提得很好，其实更好的提法是在异性动物间移植会不会有排斥反应，印象中有报道即使在近交系内，性别差异也可能介由Minor histocompatibility antigen激活排斥反应。
* ~1 D9 n8 T2 a: q  Q; s5 N& x* H
楼主的想法是可行的，约10年前心脏移植领域就通过这种思路发现供体心脏在体内的细胞嵌合现象，用FISH在女性供体心脏中检测到来源于男性受体的具有Y染色体的细胞。干细胞体内移植研究领域标记方法颇多，但相比之下原位杂交特异性还是较强的，只是需要做好对照防止假阴性。

bin

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( j) x( z; M9 p  F; l& Y, C
4 A* D! [; v& G  Y& Y% }听说用慢病毒转染GFP，然后可以筛选出稳定表达的阳性细胞，但是我没有做过，你或许可以试一试。

st_oliver

回复 bin 的帖子0 r; g& m3 C& ^% _8 t: y0 s) e

1 L$ _1 k9 l" G, U- q1 K0 m6 {谢谢你的回复，用转基因动物当然最好，只是我所研究的是猪的iPS细胞，前期由于转基因猪的获得的也比较困难，也没有得到别人的细胞，现在要做后期的研究，标记只能选择其他方法了，有没有些比较好的，标记可靠、持久的方法介绍呢

bin

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) O7 z. n) a- |: J
- o  b6 y* M* {' v% c" [标记细胞可以用绿色荧光蛋白（GFP），可以选择转基因动物来提取细胞，当然也可以取正常动物的细胞，培养后转染GFP，但是自己转染的话GFP效率不高，而且不能稳定表达，大概4周后荧光几乎就消失了，转染对细胞本身就是一种伤害。所以如果要示踪的话，我劝你还是选转基因动物吧，很方便的，当然你的想法也是不错的，但是后期检测起来可能会很麻烦，不是每个实验室都可以做到的。

st_oliver

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& e% s1 r& ^9 w请问你标记过么？是怎么标记的，用什么标记的？请教了！

临床干细胞

懵懂干细胞 发表于 2011-6-1 10:18
& b; ^0 Z* H  ?3 F! K8 z这个思想很好，在很多文献中都有用这个方法的！: L* q0 w$ L7 e% C
我给你一篇看看！就是外源的细胞来源动物与受体动物是异 ...

( F8 s& ]  j- F" C- O非常感谢，我这就看一下

临床干细胞

grape 发表于 2011-6-1 10:37 " y* z) v7 x/ Y
思路还可以。
% v  ^( ?8 s: C- @, K; p% q6 _/ [/ E但输注的干细胞和体内新生细胞如何区分？3 Z$ _  e8 I* h. K, ~) Y* @/ s
个人认为，性染色体改变不一定是受体自体产生的染 ...

/ i0 s( B( E" q# Y3 n6 a新生的细胞如果有Y染色体的话，就可以证明是由打入的干细胞分化而来的啊，难道我这样想不对吗