如何收集三维支架上的细胞

云云逍遥

最近在培养MC3T3-E1细胞，并将其接种与三维的支架上，检测碱性磷酸酶的活性。遇到一个问题，就是如何收集支架上的细胞获得细胞上清液。

aulenuyah

不能用酶消化吗？？？

realinter

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( M' u2 s0 I6 h: h# |' B8 |
建议还是直接做染色得了，定量的准确度也不够高

jiojoo

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为什么要收集细胞呢？
8 V, u* D) F+ Z3 }& r你直接加蛋白裂解液提取材料与细胞复合物总蛋白，然后去检测就可以了啊! @# l2 L& k8 d/ w
主要是看你的支架是什么性质
# f2 m9 a* [7 c4 t% c可能需要研磨、超声等

云云逍遥

回复 jiojoo 的帖子* g+ p* S6 U$ @5 o, r% @+ d
7 y& h0 e7 d7 x6 D2 ^7 G
我的支架是明胶做的三维多孔支架，我主要是测细胞在这样支架上的碱性磷酸酶的活性。我看文献都是需要把细胞裂解，取细胞上清液去测，但是怎样将细胞裂解呢？

rain2402

根据支架材料的不同，采取不同的消化方法就可以收集细胞了啊，直接消化裂解下来接着做就下边的工作了啊。

osterix

碱性磷酸酶也可以用上清来检测呀，如果一定要用细胞的，看你的支架材料性质了。如果可以用胰酶消化，那就先消化下来，在裂解可能会裂解的更充分。如果不行，那就直接加蛋白裂解裂解吧。