如何收集三维支架上的细胞

云云逍遥

最近在培养MC3T3-E1细胞，并将其接种与三维的支架上，检测碱性磷酸酶的活性。遇到一个问题，就是如何收集支架上的细胞获得细胞上清液。

aulenuyah

不能用酶消化吗？？？

realinter

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  a" c$ ?2 s) f6 W" E5 u% y. F( ^建议还是直接做染色得了，定量的准确度也不够高

jiojoo

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3 K9 u. O- l: s" N
为什么要收集细胞呢？
7 I+ z! H& q$ F6 _+ P+ F2 u你直接加蛋白裂解液提取材料与细胞复合物总蛋白，然后去检测就可以了啊
8 X$ V3 U) |7 |+ W$ `主要是看你的支架是什么性质
4 N/ w, E+ I) I- |可能需要研磨、超声等

云云逍遥

回复 jiojoo 的帖子  ~9 y$ a# t- u! C4 K
" I& H9 ?; d, R8 Q& _. d5 K
我的支架是明胶做的三维多孔支架，我主要是测细胞在这样支架上的碱性磷酸酶的活性。我看文献都是需要把细胞裂解，取细胞上清液去测，但是怎样将细胞裂解呢？

rain2402

根据支架材料的不同，采取不同的消化方法就可以收集细胞了啊，直接消化裂解下来接着做就下边的工作了啊。

osterix

碱性磷酸酶也可以用上清来检测呀，如果一定要用细胞的，看你的支架材料性质了。如果可以用胰酶消化，那就先消化下来，在裂解可能会裂解的更充分。如果不行，那就直接加蛋白裂解裂解吧。