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[请教] 免疫荧光染色   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-6-13 16:43 |显示全部帖子
首先,抗体的选择必须是选择不同种属来源的抗体。
- @; ~( l% {( d/ P+ O做荧光双标有几种常规方法:一是用试剂盒的方法进行。
+ d" N3 _* ^7 E# W5 L二:一抗可以共孵育过夜,但是这里涉及到两种一抗结合能力的问题,  Q% b3 S+ r" q0 o; f- X
所以需要摸索两者混合的比例,以达到最好的结合效果。
  f/ c6 ]( V) {* z, `* F; K三:分别弄第一一抗、二抗,再进行第二一抗、二抗。
1 D9 f" v  h  q6 ]% R    共孵育的话就涉及浓度和竞争结合的问题。可以的话最后再显DAPI。最好有阳性对照。
, A7 J& n6 _& N: H个人认为单显的话先做红光再显绿光会好一点。
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沙发
发表于 2011-6-14 12:23 |显示全部帖子
我们都是用激光共聚焦来成像,这样效果是比较漂亮的。不要在乎成本,要的是效果。/ i+ {8 |2 ]0 u: \% `2 }3 ]" A6 A
当然没有条件的话可以单通道分别拍照,再用Image J等软件叠加也行。
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