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[讨论] 关于细胞污染   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-6-14 11:32 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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最近实验室细胞污染严重,买来的四季青血清中在显微镜下见到8字型透亮的奇怪物质,不会动,有的时候是两个8字型的并在一起。此外,在培养的细胞中看到类似于黑焦虫的小黑点,非常多,有的在小范围内做无规则运动,有的迅速的游来游去,我试过勤换液,离心等方法,但还是无法除去。" B- I" Z) o$ a. i, x' u
我看过很多论坛里说黑焦虫目前是个世界性难题,无法完全除去,只能勤换液控制其不要太多,且不影响细胞活力。那我有疑问,那上海、美国等细胞库的细胞也会有这种所谓的黑焦虫的困扰吗,他们是怎样保证细胞不被污染的呢?+ C5 [' l) V( u1 ^1 E; E8 ?
大家讨论一下有没有办法去除这样的污染,以及我刚说的8字型的物质是什么。
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沙发
发表于 2011-6-15 10:31 |显示全部帖子
我最近还用细胞做了两次colony formation,10天后在显微镜下观察不到贴壁的细胞,也找不到形成的集落,培养液黄色,很澄清,这是为什么,污染吗,不是说这种黑焦虫不影响细胞活力么,郁闷。。。
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藤椅
发表于 2011-6-16 11:27 |显示全部帖子
不知道大家都用的什么牌子的血清,我们实验室用的四季青新生牛血清,昨天另一家试剂公司来说最近四季青的血清确实存在质量问题,有很多人都反映有黑焦虫的问题,还有没有人用四季青的啊,在400倍境下观察有类似问题吗?
* Z$ Z* |, Q' s( t' J* b" E/ ^我现在在PBS中也加了双抗,冲洗次数增多,还是无法去除黑胶虫。血清暂时还用四季青的,老师不给换,555。。。
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板凳
发表于 2011-6-17 13:17 |显示全部帖子
回复 biovictor 的帖子
8 W9 [7 g$ P6 P2 Z9 d8 \# ]: }
, i* K+ H4 c& e你在400倍镜下仔细观察细胞,有没有发现细胞表面有许多亮点,就像被这些亮点包裹起来了,有吗?
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报纸
发表于 2011-6-18 08:37 |显示全部帖子
我们已经决定将所有细胞扔掉,操作间的卫生进行彻底打扫,更换超净工作台的滤网,换血清,养新细胞。以后要时刻仔细观察细胞状态,但愿有效,阿门。。。养细胞的同志们都在400倍镜下仔细看看吧。。。
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地板
发表于 2011-6-23 01:18 |显示全部帖子
回复 huangcong1988 的帖子
3 `2 K7 y, |+ L
9 B9 \+ u! N5 B0 C我养的HELA,生命力很强的,三天以后本来贴壁的细胞全部死了,漂浮,在400倍镜下看到培养瓶里全是欢乐乐的小黑点。。。
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