ips复苏的问题

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ips离心去除DMSO后，重悬时是要彻底吹散成单细胞吗 如图2 还是有小集落是正常的 如图1

majing217

吹得太散了，很难形成克隆% M' ~4 a  g) F# K/ B! \

sarah19860420

如果是小鼠的可以吹成单个细胞。如果是人的IPS那么最好吹成一些细胞团为宜。亲身体验。第一次传人的IPS，消化一定时间后，细胞成大团状，怎么都吹不散，后来气愤了，对细胞进行了一番折磨，基本上都是单个的了，（这是我没想到的结果），现在细胞也在报复我，基本看不见几个克隆，而且不生长，只能耐心的等下去了。555

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, i$ E/ k, }- ?2 O5 H/ s; @+ A
非常感谢 但是没下到全文呵呵

song58

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9 `) w+ ^! B& f9 L9 Z& z& _" O
; F5 Z$ g& P# B& c恩，我现在很久没用过了，但是以前用的时候确实是在传代前后都处理，而且这个方法就是follow文献里的protocol。/ [8 y$ ]; I8 |" p9 A

: f: u' R, I4 d今天我特意搜了一下，应该可以作为参考& a# x' ~% R, O' {/ p1 W
An efficient and easy-to-use cryopreservation protocol for human ES and iPS cells.
4 A+ t2 L& G# x& z8 S5 m" ]
& s8 m% ?; @6 z6 P% ]$ b7 oBaharvand H, Salekdeh GH, Taei A, Mollamohammadi S.7 Y, h: B7 j: {% t

# J! E* k2 f& K5 y, Q$ lNat Protoc. 2010;5(3):588-94. 1 ^1 H1 L4 i# L; j6 [

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回复 song58 的帖子) o+ ?: @* K# v- ?: f

# u+ @+ M6 {" c" o5 s; @3 L: xY27632 不是提高复苏存活率吗？是复苏后加入吧  咋是传代前后呢

song58

个人经验：
$ a7 H: p) H& U8 M100nM，传代前后各处理8小时

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( Y7 b: ]) ]  f5 g
. L  f& ~. c. {Y 要加多少 - \& K2 f, G' t, F
还有其他的？0 E$ B' E6 \# q% }* x
多谢啊

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Y27632使用量是多少 ？？？？

wolfgang

鼠的iPS单细胞是必须的。人的相反，必须保持团块状。