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[请教] 细胞分泌的细胞因子怎么检测??   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-6-21 21:11 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
       各位大侠晚上好,小弟的实验中为了得到更加确切的证据,需要做某细胞分泌的细胞因子研究,请教各位,由培养的细胞分泌到培养基中的细胞因子该怎么检测?我上网看了,好像常用Elisa来检测,可不可以用West blot来检测呢?或者用什么其他的方法。我们实验室好像没有Elisa专用的仪器。谢谢各位了。
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沙发
发表于 2011-6-21 21:42 |只看该作者
知道要检测什么因子,做做elisa很简单啊,酶标仪就行了吧
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藤椅
发表于 2011-6-22 08:47 |只看该作者
Elisa.流式更好。回答完毕。
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板凳
发表于 2011-6-22 09:15 |只看该作者
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要做ELISA吧,因为是分泌到培养基里的细胞因子,western blot不能直接检测上清的。有个酶标仪就可以测ELISA,挺简单的。
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报纸
发表于 2011-6-22 09:55 |只看该作者
检测细胞因子的标本类型都有哪些呢?要检测一种细胞分泌的细胞因子,如果用培养液作为标本的话,培养液中的成分会不会造成干扰呢?如果用抽提的细胞蛋白做标本,那么蛋白在抽提前后的变化对细胞因子的检测有无影响呢?还有检测某个细胞分泌的细胞因子是否需要加刺激物呢?我说的研究对象是体外培养的细胞。刚接触这个有太多不懂,向各位讨教了……
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金话筒 优秀会员

地板
发表于 2011-6-22 12:59 |只看该作者
一般都不会造成影响的吧,取培养细胞上清,做Elisa实验即可,论坛里有实验技术protocol,可以看看
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发表于 2011-6-22 21:59 |只看该作者
可以买相关的试剂盒做,都配有说明的
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发表于 2011-6-23 17:00 |只看该作者
主要决定于你检测哪种细胞因子,这种细胞因子是分泌到培养基还是细胞质,如果是分泌到培养基就要检测上清,如果是细胞质或者细胞核蛋白就可以裂解收集蛋白做western,而且这种细胞因子在你的细胞是组成型表达还是诱导型表达,如果是诱导型的当然要加诱导剂,如PGE2,就是要检测培养基,做ELISA吧
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发表于 2011-6-25 15:42 |只看该作者
谢谢各位了,我是做SCs细胞分泌的NGF和NT-3,看来只有做Elisa了。

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发表于 2011-6-25 21:30 |只看该作者
试剂盒应该可以 按照说明操作就可以了
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