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请教关于干细胞培养过程中的问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-6-26 22:01 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
干细胞在培养过程中,增殖培养基和分化培养基的选择有何不同,如何提高细胞在培养基中的增值和分化效果?
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优秀会员 金话筒

沙发
发表于 2011-6-26 22:33 |只看该作者
   你的问题太笼统,哪种干细胞?向哪个方向分化?
$ [3 b; m/ m3 E$ p( J( h  举例:大鼠前脂肪细胞
6 [# u/ j# [4 Q细胞的分化:细胞贴壁72hr后Hanks轻轻洗去培养瓶内未粘附的物质,换用培养基C诱导和维持脂肪细胞分化,3d以后更换为培养基B,以后每三天换一次液。
* o* Y/ ?5 L2 `: o  `增殖培养基:2 q0 g* Y' h7 D- P% F
DMEM/F12 11.2g/L* N: T5 @4 V" j2 e; O+ e
10%小牛血清,
) _' B" A( n& b: v0 a; s' @7 G5 aL-Glutamin 0.35g/L7 b! `, m8 ^, H  ]+ a1 g
Hepes 15mmol/L" G1 L5 Z/ t$ \, \0 J% J
NaHCO3 15mmol/L
6 V7 u4 N4 o9 y8 R青霉素 100U/ml
" ?! }  ^; D! W9 U& c# `2 U/ l! D链霉素 100ug/ml- j4 n3 N; H! t8 n! |4 C# @- X
6 K1 L( g& J+ Y" C% ]: c' d* |
培养基B(诱脂培养基1):DMEM/F12 11.2g/L
: J  y! ~8 q" j: _  uNaHCO3 15mmol/L
& j8 Y8 H  R# ]7 E' v4 k* E0 K8 j( `Hepes 15mmol/L7 y# G& P$ T* c/ Y' _. R/ {4 C
泛酸盐 17μmol/L6 I- E" b' [+ c  D- D! {
生物素 33μmol/L; J. \5 j3 t  g: l  H! c5 K% B/ L& r. [/ O
人转铁蛋白 17μmol/L
! P& X9 t* V, w. ], f青霉素 100U/ml# c. o; r/ f1 g6 n! }! ]
链霉素 100ug/ml+ ]2 v" i, v* _+ y" f' I
氢化可的松 100nmol/L* k/ F& J+ C8 A  Q/ f; w$ I' N9 U
胰岛素 60nmol/L, O2 d0 |( w  T* T6 d- v2 a6 P! A: @. ]; a
T3 0.2nmol/L
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藤椅
发表于 2011-6-27 08:59 |只看该作者
回复 yxc 的帖子3 f; T6 s6 U& Z6 D, u: G6 u" V- ?  u

5 S' Q2 `2 O6 c  B5 ^- `我指的成肌细胞的增值和分化,谢谢!请教高手哈

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板凳
发表于 2011-6-27 23:04 |只看该作者
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找到了几篇很有价值的参考文献,想要全文的话,再想办法; e9 N% t4 J6 G7 `5 G. u
Bhagavati, S., and Xu, W. (2004). Isolation and enrichment of skeletal muscle progenitor cells from mouse bone marrow. Biochem Biophys Res Commun. 318, 119–124.8 F! y% F0 Y+ p: |( S$ g: G( u% f$ y; S+ i
& K: ]) U: k/ r; D" I, s* r' `
Gang, E. J., Jeong, J. A., Hong, S. H., Hwang, S. H., Kim, S. W., Yang, I. H., Ahn, C., Han, H., and Kim, H. (2004). Skeletal myogenic differentiation of mesenchymal stem cells isolated from human umbilical cord blood. stem cells. 22, 617–624.0 Z" O: H& f. a8 g6 L2 c: c
1 M# d5 j1 k6 M1 f- Y  t
Xu, W., Zhang, X., Qian, H., Zhu, W., Sun, X., Hu, J., Zhou, H., and Chen, Y. (2004). Mesenchymal stem cells from adult human bone marrow diVerentiate into a cardiomyocyte phenotype in vitro .Exp biol med (Maywood) 229, 623–631.
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