试着提了两次大鼠原代BMSC，均以失败告终，前辈们给些建议吧，万分感谢

taoli10000

提取的是大鼠的BMSC 细胞，腿上的两根骨头都取了，按照别人的一般操作方法进行的，直接用培养基冲洗骨髓，然后两根骨头分装至两个T25的培养瓶，所用的培养基是GIBICO买的低糖的500ml的，然后自己加的血清（10%），双抗（1%），放置三天后，有些是伸展贴壁的非常少，可以数的清，有的是贴壁的细胞都是圆圆的很多，不像是所要的细胞，感觉这些圆的细胞抑制那些伸展开的细胞生长，有些伸展的细胞较多些，呈集落生长，然后堆叠起来，但是总体上数量还是不够多，所有的细胞传代后均是同样的命运：不贴壁啊！传代消化差不多两分钟吧，然后轻敲瓶底，轻轻吹打几次。。。, i5 U4 C/ m2 z; J' x
由于条件限制，不能拍照，不知道问题到底出在哪里，在这里请教大家，希望给点建议，打算再尝试提取两次，又担心再次重复这样的问题。。。整个操作过程是看过别人有经验的人之后做的，但是就是养不起来啊！

taoli10000

回复 殆死悲爱 的帖子( m3 Q9 h0 E0 k9 L' [0 d! q& k' t& ^
# Z1 ]4 Q  y; X! h2 G
嗯，买的培养基里面有谷氨酰胺，但是那个东西很容易降解

taoli10000

回复 Learner 的帖子
4 u) x0 c0 P) u( z! c! f# W" E1 Q% p2 O' ?1 h* I& a, b
嗯！呵呵，还是非常非常感谢哦！

taoli10000

回复 cheese 的帖子( Q' q6 D: u8 B  n
, x  Q: c& |6 b+ D' }+ l+ R$ ?
嗯，是的，一般都是用6到8周的大鼠。。。

taoli10000

回复 taxuewuge 的帖子
, }) e! E8 o1 S6 T! \+ U3 o9 t6 X
嗯，谢谢，学习了哦！呵呵
6 ~! `9 W( ^3 |: N% T- u( \; J  Y: l

taoli10000

回复 luoziwei 的帖子( @) h) o) u9 i  u1 ~8 S, ~

) B& x: _0 V1 v: Q1 i( o嗯，打算下次提取的时候两根骨头提一瓶T25 的试试! v& X/ `2 P8 c" a

taoli10000

回复 飞翔的十字架 的帖子2 X6 \: U1 _1 |! c

5 d* Q( I2 n6 B" t+ i+ H呵呵呵，没有图啊。。。。打算增加细胞密度看看怎么样。。。

taoli10000

回复 lizhiyong 的帖子3 p1 G  @: G: Q

" E/ l' s9 F9 O好的，谢谢，尝试一下吧

taoli10000

回复 qiqishichaoren 的帖子/ X" i. F" R6 K$ d
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培养基一般都是4度保存的，只有里面要加的谷胺酰胺之类的是-20度保存

taoli10000

回复 如冰 的帖子6 N# L& z" n) t5 X" p5 X
- R$ x- E- \7 X8 c
谢谢啊！