细胞长成这样为什么?

cc1986

想请教高手冻存一年半多的C3A细胞（肝母细胞瘤细胞株）复苏后，长成如图所示，出现很多大大小小透明小泡，是不是细胞老化了？第一次养，所以不知道本来正常应该是怎么样的。。不好意思，虽然跟干细胞无关，还是希望细胞培养的高手能指点迷津~谢谢

jhu132llh

是挺像细胞老化了
- ^/ k+ w" m: c可能和冻存有关
7 w- [) L7 B+ X" q7 U, W& m可以多饲养几代看看会不会有所恢复6 q' y9 u( y  ?- _* S( M) d' _
也可能和饲养方法有关  q: `6 K* b$ j6 {0 ]: o% M
是不是更改了饲养环境
" L- z2 X( ?* [( Q  k5 r0 O, a也有可能就是细胞已经老化了

yiyeqiu

成团生长很严重啊，建议再次消化培养。

yinjiqingqq

建议做个菌检，排除污染问题

zsc78

C3A本身喜欢成团生长，但细胞确实老化了，传几代看能不能恢复。

superlamp

不是成团的问题，也不是细胞密度的问题，看来应该是老化了，这些很多事细胞的代谢产物，如果用ACCUTASE消化后你会发现，没多少正常状态的细胞了~

cc1986

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谢谢回答！！
8 I' U3 v5 i4 _6 y3 O2 @( H, p请问各位有没有养过或见别人养过。7 D7 R: W- J" T3 Q2 x) u/ I& g) ^1 [
我的细胞培养基配方：Gibco原装进口的高糖ＤＭＥＭ和１０%胎牛血清；
3 G( P) @) t* ]+ i6 A冻存液配方：胎牛血清：ＤＭＥＭ：ＤＭＳＯ＝１：８：１
+ h* K# u; j# {9 v" l- `如果购买的话有没有什么渠道比较快～ATCC可能要两个月，等不及啊~

cc1986

回复 jhu132llh 的帖子+ S3 [9 m( Y8 w! K, J0 V1 b1 A
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谢谢回答！！
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我的细胞培养基配方：Gibco原装进口的高糖ＤＭＥＭ和１０%胎牛血清；
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如果购买的话有没有什么渠道比较快～ATCC可能要两个月，等不及啊~

cc1986

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谢谢回答！！
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冻存液配方：胎牛血清：ＤＭＥＭ：ＤＭＳＯ＝１：８：１
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zsc78

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不知道你是哪个城市，据我所知北京某医院有这个细胞株，不知道他们培养怎么样？