肿瘤干细胞分化了，怎么办呢？

cyumin123

我做的原代肿瘤干细胞刚开始还可以，后来传代传了一次，就离心后吹打了几下，养到第二天去看的时候小球都贴壁了呢，有的开始分化了，大家碰到这种情况都是怎么处理的啊，请指教啊!

cyumin123

回复 daviddow 的帖子8 x  R! g$ ^+ I: M% [7 L# n8 w

1 u( _1 }! R' n$ h0 i没加血清，做原代的时候球还悬浮着，后来离心，换液，吹打几下就接种到新的瓶子里了，第二天去看的时候球贴壁了，球周边有一条一条的枝丫伸出来了，怀疑是分化，培养是用无血清的培养的。

cyumin123

回复 天依耶稣爱你 的帖子. J/ {9 X+ \; _# w

! }' J) X/ G. B9 M/ d0 ?是自己取标本做原代的，要的是干细胞，现在球的状态是贴壁了，球周围有枝丫冒出，怀疑是分化呢，因为当初做神经干细胞原代的时候也有出现这种情况呢。

cyumin123

回复 yxc 的帖子! k2 c2 Z! ~$ z6 L- ^) z% q

5 H; x% _9 T# ]' T谢谢你的回答，今天我在丁香园看到有人这样写的：我们实验室里的脑肿瘤干细胞，在无血清即DF+BFGF+EGF+N2的情况下会呈球悬浮生长，但在有血清条件下会分化生长！所以当我们有时候碰到悬浮状态下干细胞状态不是很好的情况下，就加入血清，让它贴壁生长，当贴壁状态很好的时候，把分化状态的细胞消化下来，离心弃上清，再加PBS漂洗，离心弃上清（即把可能致干细胞贴壁的因素去除掉），后转移到无血清培养基中！干细胞照样能悬浮生长，而且这样能使干细胞状态变好！
, k* B+ T5 d' b  r9 {+ T, p/ J; U  所以我觉得我的细胞贴壁了，但不是分化，请问你们是像上面一样处理贴壁的细胞球的吗？还有我想做分选，原代分选阳性率很低，是否可以将球传代几次后再进行标记分选？