急求软骨细胞诱导液的配置

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TGF-β1 溶液的配制方法及说明：2 j' c9 j3 A* C* Y$ q' }; c
（以下配制方法来自TGF-β1厂家答疑，本人解释总结了一下，仅供参考）：
% j% E/ G  u+ H) U1、先配制10mM（即10mmol/L）的柠檬酸溶液：9 K% H3 A! k0 o. e! h  D$ u
柠檬酸为常用的粉末状化学品，可根据您所有的柠檬酸分子量进行计算(注意看您的是无水的，还是结合水的，分子量是不同的，一水柠檬酸分子量：210.14；无水柠檬酸分子量：192.14)，称出一定量的柠檬酸，然后用双蒸水溶解、定量到一定体积，成为终浓度为10mM的柠檬酸溶液。
& D9 ]5 y! h$ x- F" a1 A. G' R0 H通常10mM柠檬酸的pH值即为3.0左右，无需调节。不过最好用pH计或pH试纸测一下，如偏差很大，用NaOH进行调节。此外，在用该柠檬酸溶液溶解细胞因子冻干粉前一定要滤过除菌，因为溶解后是不能再进行滤过处理的，否则细胞因子大多会粘在滤膜上，损失很大。 $ x& b3 {$ B7 j& D" H$ f) t

0 C9 N! h! r! v1 `* P注：M即mol/L（摩尔浓度），M是浓度单位。1M=1mol/L，1mM=1mmol/L。
) J& L1 P  M  QM与mg/L（质量/体积浓度）的换算方法：
' _2 |1 Y+ `3 P8 b+ e1M=该溶质的分子量•1mg/L；  x; t+ c% K2 [$ r! B  I  d
1mg/L=1M/该溶质的分子量。* a# w) E' k3 n; P4 v) p
5 w1 m* {. p. i7 s. S' K
配制实例：
8 |- ?0 w: e: R: H' L0 q& \取一水柠檬酸粉剂1.0507克溶于50ml双蒸水，从中取1ml柠檬酸溶液与9ml双蒸水混合，测定/调节pH，过滤。  r; m, J) e1 [. `- G- E. o* r
注释：欲配制10mM浓度的柠檬酸溶液，已知一水柠檬酸分子量为210.14，如配制50ml备用，即：
. `" N; l5 T& \3 ]  u/ K7 ?. |?mg/0.05L=10mM / (210.14 • 10)
9 s9 p) |3 d6 f; ?) Y？= 0.10507mg+ p- t9 J% \6 I7 \# X/ R
即取0.10507克一水柠檬酸溶于50ml双蒸水即得10mM浓度的柠檬酸溶液;
% q5 a8 j: c2 F+ ?1 F( p3 S7 i为了称量方便，可以先称量一水柠檬酸粉剂1.0507克，溶于50ml双蒸水，+ s# x% S% w6 I. S  o
再从中取1ml柠檬酸溶液与9ml双蒸水混合，所得10mM浓度不变。8 d; v) {' S* T6 p% i% S

1 j) l7 z- U% g0 Q) C5 ?2、用10mM（pH值3.0）的柠檬酸将TGF-β1冻干粉重悬至0.1-1.0mg/ml。
4 L% b6 e- Q7 r) L2 P& D, `注意一定要在此浓度范围内，否则蛋白活性不会完全恢复；# i; r- q, Y  J. e! I0 Q, f2 `/ C
3、然后立即用含0.1%的BSA溶液(此为缓冲液，如PBS等)或含10%FBS(小牛血清)的完全培养液将重悬过的蛋白溶液进一步稀释到一定的浓度（您的工作浓度）。特别注意的是，在用柠檬酸重悬后，一定要立即用BSA或FBS溶液进行稀释，否则因TGF-β1蛋白的吸附性极强，很快会粘附在溶解TGF-β1所用管的管壁上。4 R7 s/ w6 Z( X2 P7 Y' c4 {/ b

7 P: {& k' ^+ x保存条件：如果短期用，则一般置于2-8℃，活性可维持一周左右；* L4 [) j# C' m( P# [
如长期保存，则需分装冻存于-20℃— -80℃，至少有一年以上的效期。8 w0 B- j  b+ f' F  C

# u9 c3 h( y; r5 d: J% c8 _2 v再仔细阅读一下相关试剂的说明书。2 X" L! v5 d1 X' h) [8 P; }
其他试剂用双蒸水配制应该就可以了。