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我认为用贴壁法养出的细胞纯度最好,成功率也最高,几乎没有失败过。# L' Y0 t1 O& I, q6 d+ E% C, D; {
培养基:Fasgrow 无血清培养基
+ a4 V' i) e: M/ y实验步骤
2 F/ M0 F) v3 }. K
2 }3 g3 t; R( r! _; O, X1) 新鲜脐带,用氯化钠缓冲液冲洗;所述氯化钠注射液中不含青霉素和链霉素;
$ [, F9 ~; S3 m/ X$ l1 a2) 剪取6cm长脐带,将脐带剪成2cm长的小段,剥离人脐带华通氏胶(wharton jelly),用氯化钠缓冲液反复冲洗;
4 l7 p7 H3 `* ~; m8 A( h3) 将剥离的人脐带华通氏胶(wharton jelly)剪碎成1mm3小块;! E/ Q8 N9 q* j+ B/ s
4) 将剪碎组织加入无血清培养基洗涤,在1200r/min条件下离心5分钟,弃上清;
& [/ O2 r# ~$ R( u; `& v5) 将组织块和培养基按体积比2.5:1比例加入培养基,混匀组织块,接种至细胞培养瓶中,置培养箱中培养; |
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