抗原亲和层析纯化血清抗体

mayansen1314

我用我融合蛋白（GST+25氨基酸）做抗原已经得到多抗兔血清，我用wb及组织染色的方法检测发现杂信号极其多，我想用抗原亲和层析的方法纯化一下我的抗体，不是单纯的纯化IGg，有谁做过请给点指导建议，谢谢诶

mayansen1314

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好的，多谢关注

mayansen1314

回复 langziforever 的帖子$ I$ M4 t6 }- M" ~4 r: c
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多谢指教，western的条件我都筛了两个月了，杂信号太多就是我得出的结论。我在公司人工合成了一个肽段，已经进行免疫了，但效果不是很理想，可能是我合成太短免疫原性太低。哎，愁啊

mayansen1314

回复 siyue13 的帖子
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3 \0 h+ T/ O0 f" C# V# S有个问题想请教，在做这个亲和层析的时候你抗原抗体结合之后用什么条件再把它们拆开洗脱下来呢？还有，如果你抗原抗体洗脱下来了，在你这个洗脱液的环境下，抗原还能跟我的组织目的蛋白结合吗？有难度，理论上不可行啊

mayansen1314

回复 langziforever 的帖子: b! p6 F! E. D- x
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呵呵刚才没说清楚，我合成的肽段就是免疫的小鼠，效价有点低，不过我这次又免疫了几只，以前都是免疫四次，这次打算多免疫几次，请问它会不会产生免疫耐受呢？