抗原亲和层析纯化血清抗体

langziforever

楼主有没有想过优化western或者免疫组化的条件，因为你的抗原肽太小了，所以才会和较大的GST融合表达，但只有25aa做抗原，那这种抗原刺激下的抗体也许效价比较低，也会有很多杂信号。所以，如果这种情况你即使纯化可能也改善效果不大，建议你还是优化下反应条件。或者，你可以不用GST融合，我们以前针对这种小肽的时候，经常会把这25aa进行串联表达，然后作为抗原制作多抗，有时候也会有很好的效果，但是由于不同蛋白的抗原性不同，所以，结果如何也看运气吧！

langziforever

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& k7 a) U, l5 y" N这是有可能的，一般免疫原性低可以换个片段来试，可你这个片段太短了，所以，比较困难，不知道你们是自己打兔子制备抗体还是交给公司？有没有尝试做鼠抗，有时候兔子不行，老鼠还有可能！但还是那句话不确定因素太多了，以前有个师弟打了6个兔子，N十只老鼠，终于拿到了效价比较高的抗体，前后用时2年！最后，文章发的非常好！希望你也有这种运气！

langziforever

回复 mayansen1314 的帖子8 n" `+ X  L) K8 x; t' Y& h
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我们以前一般有过6次，一般来讲还好，但是如果再高就可能效价也不会提高多少了！