请教细胞生长曲线的问题，谢谢！

maxiaona

请问测定细胞生长曲线如果用25cm的培养瓶细胞其实接种数量应该是多少啊？
3 c. V( I1 V6 O0 e. S1 F+ J
" c7 u" J" T( }$ \* h; K- b用24孔培养板可以做吗？
' q0 e0 C: I5 ~. v* E6 H, ]- [; Z7 ~% N0 l2 d+ j! C# i
请有经验的朋友帮忙啊！谢谢！

1301918986

现在为了方便我们都拿96孔板做的，而且细胞不一样，接种密度也是不一样的。

jhu132llh

还是用96孔板做吧8 d8 M9 J. g' {: b! Z8 m% o
一般我们都是用96孔板做的  i2 b/ l& y9 X7 K
大概一个孔接种4000-10000个细胞
! z+ v- Z* d/ h然后就是计数或者MTT上机检测/ p' w& `' r: p( L; X  C
还方便的

123jiaoyue

测定细胞生长曲线一般采用96孔板，这样平行孔比较多，所得结果比较可信，看你养的是什么细胞，你可以试验不同接种密度比如说5000、10000、15000,2000、30000，看你所测得的结果，再确定你要接种多少，

rain2402

96孔板做吧。做MTT直接就检测了。用瓶和大板子你还要消化了再上96孔板。还要养。直接来把。

xiangchou812

用24也板也可以的。用用25cm的培养瓶太浪费了。# D& Y% S8 ?6 ~* J4 y

meiying3061

我想用96孔板做小鼠胚胎干细胞的MTT，用feeder养影响结果吗？

hanwei0610

测定生长曲线的常用两种方法：直接计数细胞和MTT法。
. Y8 b" J7 ~' Y. N9 C7 d2 }# wMTT法：一般常用96孔板，可以有多个复孔，重复性好，可信性高，同时相对节省细胞资源。
! H/ P) Z. }# `4 }直接计数法：可以用24孔板或96孔板，我个人喜欢24孔板，相对操作简单些，也可以设多个复孔，细胞用量（与用瓶子养相比）要少很多；, I' t) A: f7 L$ J# G4 y* x  G
                     缺点是人工计数的主观性强，操作的重复性和准确性可能会有较大的差异。5 x- O) T4 D6 _* E
接种细胞的密度由你所培养的细胞大小、细胞生长状况和接种后的培养时间及来决定。一般大小的细胞96孔板接种4000-10000个，# [8 f- C. h4 k7 F5 ~. Y
如果你的体积细胞很大或者很小，可灵活调整；细胞增值快的，接种后需要测定的时间（5-7天）越长，就越要考虑细胞生长空间，3 l! b6 w. _# E
否则，最后细胞会被挤死，测量的曲线就不够准确了。5 x' V$ I9 v: l+ p+ k0 @

0 e& N; w+ s1 t3 ?4 @2 R( b# r/ j6 }

OBGYNob

回复 hanwei0610 的帖子8 m& i- \- ^) n9 N6 K/ R% K
3 [2 [% t, h" U( R1 L8 W9 R
请问，24孔板接种的密度大概是多少呢？我做的是羊水干细胞，谢谢

havie

每孔大约接种12000左右，3 x0 L( i& K; Z, m
不过，还要根据做实验的目的，调整接种密度