请教细胞生长曲线的问题，谢谢！

maxiaona

请问测定细胞生长曲线如果用25cm的培养瓶细胞其实接种数量应该是多少啊？
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* x& b* n- Y6 h; }2 ?  P用24孔培养板可以做吗？7 N( W0 D- ~. i# H, Z. z
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请有经验的朋友帮忙啊！谢谢！

1301918986

现在为了方便我们都拿96孔板做的，而且细胞不一样，接种密度也是不一样的。

jhu132llh

还是用96孔板做吧. x5 Y$ s$ @  B  x
一般我们都是用96孔板做的
2 h& f7 z/ {9 w. {大概一个孔接种4000-10000个细胞) G0 z; L, S) X% u! V( s0 f4 I, y% o0 Q
然后就是计数或者MTT上机检测9 A2 n5 c8 V( B2 W  P
还方便的

123jiaoyue

测定细胞生长曲线一般采用96孔板，这样平行孔比较多，所得结果比较可信，看你养的是什么细胞，你可以试验不同接种密度比如说5000、10000、15000,2000、30000，看你所测得的结果，再确定你要接种多少，

rain2402

96孔板做吧。做MTT直接就检测了。用瓶和大板子你还要消化了再上96孔板。还要养。直接来把。

xiangchou812

用24也板也可以的。用用25cm的培养瓶太浪费了。
# G1 V) l, m% ^" d

meiying3061

我想用96孔板做小鼠胚胎干细胞的MTT，用feeder养影响结果吗？

hanwei0610

测定生长曲线的常用两种方法：直接计数细胞和MTT法。
  F% u/ t' S* `% B( hMTT法：一般常用96孔板，可以有多个复孔，重复性好，可信性高，同时相对节省细胞资源。
" g1 i  k; K) ~5 \% ?. q* N) [直接计数法：可以用24孔板或96孔板，我个人喜欢24孔板，相对操作简单些，也可以设多个复孔，细胞用量（与用瓶子养相比）要少很多；% g! S+ z9 u8 T. O6 \) P6 e% d
                     缺点是人工计数的主观性强，操作的重复性和准确性可能会有较大的差异。/ X: g$ j" u# Z" ~. X
接种细胞的密度由你所培养的细胞大小、细胞生长状况和接种后的培养时间及来决定。一般大小的细胞96孔板接种4000-10000个，0 X& B, ]0 y+ e1 A5 R
如果你的体积细胞很大或者很小，可灵活调整；细胞增值快的，接种后需要测定的时间（5-7天）越长，就越要考虑细胞生长空间，
# u. i6 M+ ^# y" {# H  [否则，最后细胞会被挤死，测量的曲线就不够准确了。) o1 p# D$ r$ b' F2 b. Z
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OBGYNob

回复 hanwei0610 的帖子; H! J7 y4 a% E
: E& B% C" h4 R/ Y3 B
请问，24孔板接种的密度大概是多少呢？我做的是羊水干细胞，谢谢

havie

每孔大约接种12000左右，7 k7 ?% K$ K+ u3 K  _0 R% F+ v# _4 K
不过，还要根据做实验的目的，调整接种密度