经历两次BMSC提取失败后终于看到曙光，在此感谢大家的帮忙！分享一下实验改进

nightvsday

一般我提MSC不需要加双抗的

james_0619

我做的是SD大鼠，取的是股骨，原代还好，长得还行，一传代就不行了，细胞稀稀拉拉的不知道问题出在哪里！我还加了双抗啊
: p8 E3 ~' \5 h, u$ j6 {3 C难道是没加1%的谷氨酰胺？？很希望得到楼主的真传啊0 q5 {4 |6 M8 V1 @+ p3 g: k4 P  `( n1 k& U

yishengyouwoly

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5 O6 F' `+ O, s1 c
p4的时候做流式能达到，90%很难相信呢，之前听同学说，自己养得细胞，分选的时候只有百分之几，我就是自己养得，很受打击。

jss667795

回复 taoli10000 的帖子4 s4 n5 D) O0 s9 c# M- f/ J4 ]

8 N  L# X; G, i/ SLZ,血清密度提高后细胞长的如何呢？我也养大鼠的，WISTAR。但是一直养的不太好，怀疑是密度太低。细胞很容易老化。 到现在也没养出来，同是新手还希望多多交流哈`！

taoli10000

回复 gact 的帖子2 E# K4 e* S) Q  k9 `

4 p/ |8 J" N4 o1 F8 PRat的，呵呵
$ ^/ h2 A3 e! s; E/ i  H9 V& f3 O/ C

taoli10000

回复 yishengyouwoly 的帖子/ k+ g5 j0 a9 n$ s- p

- C3 F/ O: i  `* k1 v我用的是SD大鼠全骨髓培养，后面的细胞鉴定还没做的，据我了解一般都是在第四代的时候做流式可以达到百分之九十几了

1301918986

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; O: ?" I9 I/ ?: _谢谢你的分享，我最近在养兔BMSC，原代总是那么不顺利。看了你的实验下次在改进一下，希望能成功。

yishengyouwoly

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. ~( l' Y+ |- S8 k
2 p( K7 V, n+ B7 k5 E恭喜你养这么好，你养的是sd大鼠吗？用的是全骨髓培养法还是密度梯度法？我是用全骨髓法，感觉杂细胞多，而且p2开始细胞形态就不好了。有战友建议用密度梯度离心和GIBICO的血清培养。

gact

回复 taoli10000 的帖子$ R3 Y1 F& j5 v& p3 C
  U3 [5 @, q) I' R# X' j
发贺电，，，B-MSC是mouse的？
9 z! M: p6 D& ]: `/ J8 z3 _

taoli10000

回复 iceyang 的帖子
. }# t9 U1 B9 z3 N; M1 h( Q( r! [+ J8 O. t& |5 _) j
嗯，养起第一次后面就有信心些啦，打算逐渐放宽条件，让它们在艰苦点的条件下茁壮成长。。嘿嘿