求助：BD matrigel 用法

liufutang

请教达人，我想用BD matrigel 及mTesR培养人iPS（六孔板），请问matrigel怎么用？需要稀释吗？怎么铺班子？谢谢！

bigben446

( ]+ X& \; G$ P9 l& s; f; j

sarah19860420 发表于 2012-2-4 01:38 3 i5 M0 z% ]2 v' m7 B
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! Q& P: W8 R$ X: t, U) M* Y
" _  K* d5 F& J4 ~+ h0 q. X这个浓度在哪里可以知道呢，我的matrigel 货号是356230， lot:27690

# d; n+ O! e# ?5 i
9 r0 F2 d! _4 t$ ~1 s! }; y+ S你的matrigel产品的分析认证
' @9 \: S# [) X" t9 ~8 [http://regdocs.bd.com/regdocs/view/coa/000000000000356230_27690.pdf( n4 ]& R% L; L5 r5 f# H! n
蛋白质浓度：11mg/ml
0 x2 D0 T; r& d, L% m  ^, A* v4 q2 U3 O: S0 i7 P# C
基质的稀释倍数由BD Biosciences根据每批号的蛋白质浓度计算。
' k8 ]3 E' f: g+ g蛋白质浓度请参阅产品的指定分析认证，也可根据LOT货号在线查询获取。
' u. C$ @, K2 B: i- xhttp://regdocs.bd.com/regdocs/searchCOA.do

chutu

照我的理解，Matrige在细胞培养中l有两种用法，一种是形成胶状基质，类似半固体培养基；另一种是只让Matrigel的蛋白在培养皿上吸附一层，就像一般包被明胶那样。前一种用法一般不稀释，除非是高浓度，告诉你需要稀释后使用。Matrigel原液在4度时是液态，在37度时成为凝胶状，在凝固之前与细胞混合，细胞最后就镶嵌在凝胶层里；如果在凝固之后接种，细胞是长在凝胶层表面。加的量多少决定形成的凝胶的厚度，1mm 或0.5mm。如果是用Matrigel包被培养皿，稀释以后再用，否则浪费。稀释多少倍最好根据辅助细胞吸附的效果优化，想偷懒就参照说明书推荐的稀释倍数。是不是这样？

ly200101042

每个批次浓度都是不一样的啊

开心果王

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' T5 N, f9 G# u+ F+ I6 j
9 P  N  u' v# B' w  f我是先原液分装，用之前再稀释的。我用的是普通的matrigel（354234），如果是干细胞专用的话，可以根据批号查询稀释倍数的。

sarah19860420

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, }' W( u2 S3 R5 L5 n4 r: S  ]; N& H1 \) r. d! D
浓度是说明书上的 protein concentration吗？

sarah19860420

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& X5 \2 }/ s0 r$ `4 \! e$ L7 _3 a; I4 b8 T, a3 b" h& r1 y$ `
这个浓度在哪里可以知道呢，我的matrigel 货号是356230， lot:27690

sarah19860420

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' `5 d6 G4 P: q不用看浓度吗，1:30是指与原液1:30稀释吗，那原液分装的时候直接稀释，还是使用前再稀释呢？

sarah19860420

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4 n" ?2 d/ ~5 t+ P  C+ d
* k" V1 y: ]$ h您好，我现在也很要用matrigel做实验了，我是根据WI-CELL的protocol做实验，但是我现在找不到BD MATRIGEL的浓度在哪里，可以告诉下吗？还有就是如果是0.5mm厚度的话，那么6孔板的一个孔一般要加多少呢？

liufutang

谢谢各位的回答！今天我就试验一下。