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[请教] 求助:BD matrigel 用法 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-7-28 18:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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请教达人,我想用BD matrigel 及mTesR培养人iPS(六孔板),请问matrigel怎么用?需要稀释吗?怎么铺班子?谢谢!
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沙发
发表于 2011-7-28 22:54 |只看该作者
wicell上是根Matrigel的浓度来铺板的,我做分化用这个,用的是1:20细胞贴壁非常好
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藤椅
发表于 2011-7-28 23:26 |只看该作者
我是用1:30稀释后包被板子1h,吸掉就可以用了,如果想省点的话,可以再将其收集起来在加入另一个新的板子里,4度过夜处理!用tesr养的话应该没问题的+ J) j# F4 ]$ @+ q
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板凳
发表于 2011-7-29 08:02 |只看该作者
本帖最后由 grape 于 2011-7-29 08:08 编辑
8 M" P% w" o8 J& o2 a
; L, m9 c2 t  A3 y$ N回复 liufutang 的帖子; k8 {( J$ b, y+ i8 ]6 g$ ^6 x
1 t, _. t2 v" n' _3 i$ b
BD Matrigel基质胶说明
$ S; L: `' H: t& K) Z/ }, C- c7 @7 V! o
BD Matrigel是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质,其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。在室温条件下,Matrigel聚合形成具有生物学活性的三维基质,模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能,有利于体外细胞的培养和分化,可用于对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达等的研究。
/ x+ J- V4 M; d7 ?) |BD Matrigel基底膜/基质胶形成的三维培养基质,可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时,Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达,支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。$ |- m% L# _6 ^* h% e
不同配方的BD Matrigel可以满足不同的实验要求。低生长因子(GFR)的Matrigel基底膜基质适用于对基质成分要求严格的实验,如细胞信号通路和细胞因子的研究等。不含酚红的Matrigel适用于荧光检测或显色反应等分析。高浓度的Matrigel适用于研究血管生成、肿瘤细胞迁移和体内肿瘤模型的建立等。
# z" A9 _, [/ k7 M& _, {! P6 m0 c
, o# r* J0 P. \: \ 未命名.JPG
& T5 j- Y3 `9 q$ l+ y5 F
9 J8 l  r& K, \  L, |来源:EHS小鼠肿瘤& F2 v9 ?: e3 @/ E
使用指南:培养细胞时,Matrigel可无需稀释直接包被,包被厚度可为0.5 mm(薄层)或1.0 mm(厚层)。Matrigel也可以在无血清培养基中稀释后用于包被培养器皿表面,根据细胞类型和应用目的确定相应Matrigel浓度。8 Y" e" v9 t, N9 u  B6 Q7 o
保存条件和效期:-20℃下冷冻保存,避免多次冻融。保质期详见产品说明。
8 w1 z* F1 B& U( t- T
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runsong + 2 + 5 学习了

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发表于 2011-7-29 09:00 |只看该作者
谢谢各位的回答!今天我就试验一下。

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地板
发表于 2011-7-29 09:01 |只看该作者
谢谢各位的回答!今天我就试验一下。

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发表于 2012-2-4 01:35 |只看该作者
回复 grape 的帖子2 n% [7 g5 R: B/ c6 Z' [! Q+ k2 j# ]  l
8 G) E+ q2 ~6 T7 u$ V9 u- y: ]
您好,我现在也很要用matrigel做实验了,我是根据WI-CELL的protocol做实验,但是我现在找不到BD MATRIGEL的浓度在哪里,可以告诉下吗?还有就是如果是0.5mm厚度的话,那么6孔板的一个孔一般要加多少呢?
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发表于 2012-2-4 01:36 |只看该作者
回复 开心果王 的帖子+ @; V" w, w- I. u
, B8 S( C# V( i
不用看浓度吗,1:30是指与原液1:30稀释吗,那原液分装的时候直接稀释,还是使用前再稀释呢?
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发表于 2012-2-4 01:38 |只看该作者
回复 ly200101042 的帖子
6 _7 `1 ~, p4 ^: I  O" Z/ {
, C' z) Q$ C4 O" T& m这个浓度在哪里可以知道呢,我的matrigel 货号是356230, lot:27690

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发表于 2012-2-4 01:42 |只看该作者
回复 ly200101042 的帖子: I, U! m  Q( g0 O% C3 ^' Y: n
/ y, X' h8 h) B& c2 G
浓度是说明书上的 protein concentration吗?
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