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[请教] 求助:BD matrigel 用法 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-7-28 18:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教达人,我想用BD matrigel 及mTesR培养人iPS(六孔板),请问matrigel怎么用?需要稀释吗?怎么铺班子?谢谢!
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沙发
发表于 2011-7-28 22:54 |只看该作者
wicell上是根Matrigel的浓度来铺板的,我做分化用这个,用的是1:20细胞贴壁非常好
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发表于 2011-7-28 23:26 |只看该作者
我是用1:30稀释后包被板子1h,吸掉就可以用了,如果想省点的话,可以再将其收集起来在加入另一个新的板子里,4度过夜处理!用tesr养的话应该没问题的
- J9 [5 h  }3 n) W6 U
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发表于 2011-7-29 08:02 |只看该作者
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本帖最后由 grape 于 2011-7-29 08:08 编辑
% P* P' @4 g0 V9 v7 e7 b) C, j, c  b9 G: l, z3 w- Z
回复 liufutang 的帖子: G( F# M9 g8 Q! J
/ X; ?4 m2 `/ \, u7 t$ _
BD Matrigel基质胶说明
' n: C# _1 }' B$ {( z* r( v3 U5 l; m
BD Matrigel是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质,其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。在室温条件下,Matrigel聚合形成具有生物学活性的三维基质,模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能,有利于体外细胞的培养和分化,可用于对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达等的研究。: ?+ z3 U% G# T, V' p4 n- U. x9 ^
BD Matrigel基底膜/基质胶形成的三维培养基质,可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时,Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达,支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。) v9 ?1 b4 M* i
不同配方的BD Matrigel可以满足不同的实验要求。低生长因子(GFR)的Matrigel基底膜基质适用于对基质成分要求严格的实验,如细胞信号通路和细胞因子的研究等。不含酚红的Matrigel适用于荧光检测或显色反应等分析。高浓度的Matrigel适用于研究血管生成、肿瘤细胞迁移和体内肿瘤模型的建立等。2 }% t. e( C2 Z! |/ m

9 t: z' v  w; {  K% r! R4 s: d0 n/ X 未命名.JPG
2 X$ @& w& X$ E) C0 ~! Y# K
* ]1 ?1 J& R% c5 E5 I0 R来源:EHS小鼠肿瘤5 F4 K7 b% |$ {7 z0 t
使用指南:培养细胞时,Matrigel可无需稀释直接包被,包被厚度可为0.5 mm(薄层)或1.0 mm(厚层)。Matrigel也可以在无血清培养基中稀释后用于包被培养器皿表面,根据细胞类型和应用目的确定相应Matrigel浓度。
6 W# r  ~$ b/ A4 P7 Z4 o2 y保存条件和效期:-20℃下冷冻保存,避免多次冻融。保质期详见产品说明。
( v/ ]) w+ g% a* R4 L
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runsong + 2 + 5 学习了

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发表于 2011-7-29 09:00 |只看该作者
谢谢各位的回答!今天我就试验一下。

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地板
发表于 2011-7-29 09:01 |只看该作者
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发表于 2012-2-4 01:35 |只看该作者
回复 grape 的帖子6 F$ ~: X; G3 C; q1 O$ z" }3 W

4 H0 {4 {) h8 ?, C您好,我现在也很要用matrigel做实验了,我是根据WI-CELL的protocol做实验,但是我现在找不到BD MATRIGEL的浓度在哪里,可以告诉下吗?还有就是如果是0.5mm厚度的话,那么6孔板的一个孔一般要加多少呢?
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发表于 2012-2-4 01:36 |只看该作者
回复 开心果王 的帖子
+ Q5 k6 b/ r! x1 `7 i. U8 l# ^8 V$ C" I  W: C8 m' b
不用看浓度吗,1:30是指与原液1:30稀释吗,那原液分装的时候直接稀释,还是使用前再稀释呢?
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发表于 2012-2-4 01:38 |只看该作者
回复 ly200101042 的帖子1 I9 l" a7 P+ L

7 V7 B- c" y; n' V7 Z$ X9 B这个浓度在哪里可以知道呢,我的matrigel 货号是356230, lot:27690

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发表于 2012-2-4 01:42 |只看该作者
回复 ly200101042 的帖子( h  g. q* |" ^% `( {4 k
2 u* W& u: x8 B) [! X: A6 |' _- J
浓度是说明书上的 protein concentration吗?
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