求助：原始生殖干细胞的传代方法

majing217

我目前在养原始生殖干细胞，但是对于原始生殖干细胞的传代方法一直没找到好的方法，想求助与各位前辈，有没有好的传代方法交流一下。谢谢

houbara

原是生殖细胞能不能在体外长期培养，不转化为eg

hcluo

一般5-7天传代吧，不要太频繁，另外，如果养成细胞系了，一般传完以后后长起来的，如果不是株系就很难说了。

majing217

这个我没有尝试过
8 o1 `& Q* K! I; u  p5 ]1 l9 E

ellapan

哦 你是分离生殖干细胞时采用酶消化， 就猪的而言可否尝试针刺释放哪？
8 O3 [9 P; @9 O# V- V/ S! p

ellapan

个人看法，一是你的细胞浓度太低的话会导致克隆在生长和传代时逐渐萎缩而消失，二是你传代时怎么还要用酶消化那？不知是否有误？ 三是你的培养液的成分不适合干细胞的增殖，进而分化了。 可否就你的具体培养液和方法展示出来，这样大家也好有个参考！！

majing217

回复 yangpan521 的帖子
2 W. E$ J. N8 B& j3 U, p* o! }
4 ^$ \2 C, p  U那你用这个培养液养出来的原始生殖干细胞状态怎么样?那个神经生长因子起得是什么作用啊？再就是你的干细胞培养液中加了多少量的bFGF?4 C+ B; a7 o* B$ D9 n7 w

majing217

回复 yuanyan2010 的帖子
" B/ D0 q. t( e# n7 H/ H! \1 M7 L' x  T+ f3 z, T
我做的是猪的原始生殖细胞，现在取的是26天的胚胎，培养液是正常干细胞的培养液，但是没有加bFGF。

jhu132llh

回复 yangpan521 的帖子! I& D; t8 J" H% L7 ^. y

4 b. E$ u  l" H4 f' ^7 SＧＤＮＦ是神经生长因子

yangpan521

回复 yuanyan2010 的帖子
/ s0 e7 I! f& Z, L+ X5 |/ V6 k8 c5 \
12.5天的生殖脊，培养液是干细胞培养液+ＧＤＮＦ（不只是什么东东，是老板给的，具体也没查到）