与个体基因型致敏DC共培养可增强CIK对多发性骨髓瘤细胞的杀伤活性

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主题：与个体基因型致敏DC共培养可增强CIK对多发性骨髓瘤细胞的杀伤活性6 g. g) G- ?1 _; |5 @0 U

: E; L( w, a4 {" ^6 S- {3 e# T+ d说明：原文来自haematologica，干细胞之家新闻小组成员deron翻译（转帖请注明）
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. v* Y& |1 x  R$ v/ s翻译内容：8 I& k. b- I9 q8 U4 y
很多学者报道多发性骨髓瘤（MM）特异性抗原致敏的树突状细胞（DC）在体内外应用的研究，这种DC细胞用以对MM进行免疫治疗。数据显示包括T细胞在内，整个固有免疫系统均对MM有毒性反应。这里，我们检测了细胞因子诱导杀伤性（CIK）细胞对骨髓瘤细胞的细胞毒作用。这种多克隆效应群体包含T细胞、NK细胞和NKT细胞。
( y6 E! j5 i  J7 [设计和方法5 H/ A2 m4 n& D
从MM病人白细胞层或血液中培养出的CIK细胞，与自体基因型致敏的DC细胞共培养。乳酸脱氢酶释放试验检测细胞毒作用。
6 C- {9 R# d" D/ \4 P结果: x* B1 g6 G" L+ S% Q' q. j7 e, s
CIK细胞能够以低的效应/靶细胞比率溶解MM细胞。在与特异性致敏DC细胞共培养后，上述效应明显增强（83.8%的溶解率，效应/靶细胞比为16：1）。用干扰素γ分泌型磁珠分选后，CIK细胞以较低的效应/靶细胞比（5：1）达到最高的细胞毒作用。在完全自体环境中富集一位MM患者的CD138+细胞后，CIK细胞也呈现出高细胞杀伤活性（54.4%溶解率，效应/靶细胞比为6：1）。有趣的是，(CIK)没有针对骨髓CD138-片段的细胞杀伤活性。) ^( Q- ?; T/ Q
说明和结论+ O: x6 `5 A( ]' @! p$ w1 v
用效应细胞的混杂群体组分，我们能够激活固有和适应性免疫系统对抗骨髓瘤细胞。CIK细胞对MM细胞表现出高溶解活性，且这种活性在（CIK）与抗原特异性致敏DC细胞共培养后，能够得到加强。! ?2 [: j- D# e4 N$ J  I

" |0 j1 G6 [- A9 p原文：   

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关于DC&CIK培养的protocol，这篇也算是很经典的了6 ^3 B8 [- Y# _2 B
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DC培养' t5 b( r  j7 z
用ficoll密度梯度离心法，从健康供者或从MM患者血液中分离出外周血淋巴细胞。血液抽取遵循当地伦理委员会方案标准。细胞以5×106/ml的密度，在含10%自体热灭活血清的1640液中，六孔板中贴附1小时。未贴壁细胞收集用以培养CIK细胞。贴壁细胞在2ml/孔的培养基中培养，培养基成分为10%自体热灭活血清、750U/ml粒/巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和500U/ml白介素4。* J% T* l: d5 P% q/ K! O8 Y

8 W' b* R  |$ O  K) g3 NCIK细胞培养) c- i+ {7 [/ H+ l( @9 T
0天        ，干扰素γ1000U/ml。
) h* O! I  j1 E) w  _3 P24h孵育后，50ng/ml抗CD3，100U/ml白介素1，300U/ml白介素2。4 ~! D) m0 u) ^# `) \, y* R
细胞在37℃、5%二氧化碳环境中培养，每3天以3×106/ml的密度补充新鲜培养基和IL-2。
$ |# S. R& e, R$ r9 X) ]完全培养基组分：10%FBS、25mM Hepes、100U/ml青霉素和100ug/ml链霉素。% i& n# B! F0 `/ V- N2 p, p  f! ?8 s* w. S

& |7 ?4 [, I& [. Z研究者也在结果中观察到CIK细胞可以以低效应/靶细胞比率杀伤MM细胞，在与致敏DC共培养后可以明显增强这种杀伤效应