与个体基因型致敏DC共培养可增强CIK对多发性骨髓瘤细胞的杀伤活性

deron

主题：与个体基因型致敏DC共培养可增强CIK对多发性骨髓瘤细胞的杀伤活性
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3 X2 G/ C5 K$ F- H2 n说明：原文来自haematologica，干细胞之家新闻小组成员deron翻译（转帖请注明）
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% q3 t$ C- S: A, N* M翻译内容：
/ c& s, h2 M- e* v: B! U" t很多学者报道多发性骨髓瘤（MM）特异性抗原致敏的树突状细胞（DC）在体内外应用的研究，这种DC细胞用以对MM进行免疫治疗。数据显示包括T细胞在内，整个固有免疫系统均对MM有毒性反应。这里，我们检测了细胞因子诱导杀伤性（CIK）细胞对骨髓瘤细胞的细胞毒作用。这种多克隆效应群体包含T细胞、NK细胞和NKT细胞。/ q6 I' V( L! B% x2 ^4 e
设计和方法
6 Q; o5 D  Y) f/ i- N9 @从MM病人白细胞层或血液中培养出的CIK细胞，与自体基因型致敏的DC细胞共培养。乳酸脱氢酶释放试验检测细胞毒作用。, R! E. H6 @) s& \" [& t3 `3 A
结果
9 C' |: ]& B& S1 Y  _CIK细胞能够以低的效应/靶细胞比率溶解MM细胞。在与特异性致敏DC细胞共培养后，上述效应明显增强（83.8%的溶解率，效应/靶细胞比为16：1）。用干扰素γ分泌型磁珠分选后，CIK细胞以较低的效应/靶细胞比（5：1）达到最高的细胞毒作用。在完全自体环境中富集一位MM患者的CD138+细胞后，CIK细胞也呈现出高细胞杀伤活性（54.4%溶解率，效应/靶细胞比为6：1）。有趣的是，(CIK)没有针对骨髓CD138-片段的细胞杀伤活性。
' q! j' L$ w! b4 F: q% ]说明和结论  c3 n$ e6 J9 q3 |5 ]- Q
用效应细胞的混杂群体组分，我们能够激活固有和适应性免疫系统对抗骨髓瘤细胞。CIK细胞对MM细胞表现出高溶解活性，且这种活性在（CIK）与抗原特异性致敏DC细胞共培养后，能够得到加强。( z8 S9 k8 r- ~- I0 v
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原文：   

deron

关于DC&CIK培养的protocol，这篇也算是很经典的了& A; {  e! H( c9 j9 q4 c% e# n

9 V7 l1 U' S8 f% X; t# a9 F4 Q* eDC培养
2 U4 }& U8 o$ v4 s" @' q5 o3 S1 s9 `用ficoll密度梯度离心法，从健康供者或从MM患者血液中分离出外周血淋巴细胞。血液抽取遵循当地伦理委员会方案标准。细胞以5×106/ml的密度，在含10%自体热灭活血清的1640液中，六孔板中贴附1小时。未贴壁细胞收集用以培养CIK细胞。贴壁细胞在2ml/孔的培养基中培养，培养基成分为10%自体热灭活血清、750U/ml粒/巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和500U/ml白介素4。" \$ o: K9 A' o

% e% G1 H% O0 q2 f) v) B2 @CIK细胞培养
0 w4 v9 T( D# K, D  A0天        ，干扰素γ1000U/ml。9 l; P/ \' x, h! [5 v. s: t3 a
24h孵育后，50ng/ml抗CD3，100U/ml白介素1，300U/ml白介素2。
: G/ C9 N5 R, b& a# R" D细胞在37℃、5%二氧化碳环境中培养，每3天以3×106/ml的密度补充新鲜培养基和IL-2。
- |% M& t% F( b0 c, T6 Y完全培养基组分：10%FBS、25mM Hepes、100U/ml青霉素和100ug/ml链霉素。+ Q- I3 d/ v' Y% V

0 M8 K7 c' {- Z  B, B8 L研究者也在结果中观察到CIK细胞可以以低效应/靶细胞比率杀伤MM细胞，在与致敏DC共培养后可以明显增强这种杀伤效应