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[讨论] sp细胞分选,没有sp [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-8-7 19:18 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我做了两个细胞系的sp细胞分选,都是文献中报道有sp的,但我的结果中却都没有sp,不知道问题出在哪里,有哪位高手可以不吝赐教!先谢过了!!(图中是Hoechst组的,设的门里面的细胞比例和阻断剂组的没有差异)

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沙发
发表于 2011-8-7 19:56 |只看该作者
1.细胞状态不好7 L2 [+ Q7 a$ y9 u+ _% a& V( n
2.检查hoechst浓度是否过高,或者染色时间过长
* p. e8 L. A( y% v$ R) s0 w" X3.分选机器光路没有调好3 O7 B/ `- r( ]! W" z/ q
4,其他我也不知道的原因
1 o9 s2 M7 I: e: D$ n希望对你有帮助,祝顺利哈
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藤椅
发表于 2011-8-7 23:10 |只看该作者
回复 bestgloria 的帖子
$ }# |0 x' b. C3 w% k4 R2 J  l+ ]& Q8 {: I& ]. F$ E9 C6 q2 N/ {
非常感谢阿!我说说你提的这些具体的情况吧
4 E; ^* x, D. n9 }3 _# b* G1.之前有人也给我提出过细胞状态的问题,后来我又做的结果中细胞能够圈进80%这样,但还是没有(明天上图)。
9 ?- c# V: D" {* o0 G5 L2 r2.hoechst的浓度我有一个细胞系用的是5ug/ml染90min,另一种是4ug/ml染60min(浓度再高细胞就死了),还可以往下调吗?  E$ e2 W. A; w5 B
3.分选的机器我就不了解了。。。可能会是什么问题,我跟技术员沟通沟通  r1 K$ Q) }$ {5 [, W5 q! f5 x- C3 c
我纳闷的是,其中有一个细胞系文献报道sp有30%以上(还是比较牛的杂志),我觉得再不济,我的结果也不能一点sp都没有阿,我的细胞状态也还可以阿9 l& \0 x  w$ |" L$ B% ~+ b3 }
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板凳
发表于 2011-8-8 11:49 |只看该作者
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要是各种原因都排除了,那么就一个可能了------“文献中报道”的是假的
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金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2011-8-8 17:07 |只看该作者
图看上去挺漂亮的,不知道加verapamil的图怎么样?祝下次好运
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地板
发表于 2011-8-11 10:22 |只看该作者
回复 leisong12 的帖子1 d  Z" n: q6 d! L

5 K3 p- M! {! P  q1 ~加verapamil的图跟这个一抹一样……
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发表于 2011-8-11 10:31 |只看该作者

# f8 R# p& r* Z# M后来一次的图,上面是B组,下面是C组,因为没有差异,所以没有设门

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发表于 2012-7-5 22:54 |只看该作者
回复 zhzxyx 的帖子) M. g! x" w* E. y+ X# c5 p

. k# t+ ]# P& o! b" b' W; w4 A楼主现在分到sp细胞了吗?目前遇到了和楼主一样的问题,望不吝赐教!多谢

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小小研究员

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发表于 2012-7-5 23:33 |只看该作者
回复 xubq2011 的帖子& {; m1 r# D  R% y$ v1 S2 G9 u

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