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[讨论] sp细胞分选,没有sp [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-8-7 19:18 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我做了两个细胞系的sp细胞分选,都是文献中报道有sp的,但我的结果中却都没有sp,不知道问题出在哪里,有哪位高手可以不吝赐教!先谢过了!!(图中是Hoechst组的,设的门里面的细胞比例和阻断剂组的没有差异)

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沙发
发表于 2011-8-7 19:56 |只看该作者
1.细胞状态不好- P( ~5 I5 ^0 a% |: I+ ^  q& u
2.检查hoechst浓度是否过高,或者染色时间过长3 |" c6 T6 x  }" \' f3 d
3.分选机器光路没有调好
0 Z- M, W6 @6 C1 a4,其他我也不知道的原因
0 V1 X/ h: |( `1 p: v希望对你有帮助,祝顺利哈
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藤椅
发表于 2011-8-7 23:10 |只看该作者
回复 bestgloria 的帖子
; V& z+ M9 r  O* k! i" L
; M+ W. V/ H; U4 I非常感谢阿!我说说你提的这些具体的情况吧
+ W9 H: y6 d2 f: t( G1 [# G1.之前有人也给我提出过细胞状态的问题,后来我又做的结果中细胞能够圈进80%这样,但还是没有(明天上图)。
& }% W% Q% O- ^/ g( Z2.hoechst的浓度我有一个细胞系用的是5ug/ml染90min,另一种是4ug/ml染60min(浓度再高细胞就死了),还可以往下调吗?
3 x  ^* B2 t1 a3.分选的机器我就不了解了。。。可能会是什么问题,我跟技术员沟通沟通9 y, k1 ]! f8 @' K& }( @" S
我纳闷的是,其中有一个细胞系文献报道sp有30%以上(还是比较牛的杂志),我觉得再不济,我的结果也不能一点sp都没有阿,我的细胞状态也还可以阿1 w8 q8 U' Y, e
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板凳
发表于 2011-8-8 11:49 |只看该作者
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要是各种原因都排除了,那么就一个可能了------“文献中报道”的是假的
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金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2011-8-8 17:07 |只看该作者
图看上去挺漂亮的,不知道加verapamil的图怎么样?祝下次好运
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地板
发表于 2011-8-11 10:22 |只看该作者
回复 leisong12 的帖子
8 @! P' k) D& b5 k; |+ |0 h: ~6 r% U) e1 u! \
加verapamil的图跟这个一抹一样……
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发表于 2011-8-11 10:31 |只看该作者
' w6 [" Z! N( Z0 C+ o% p- j5 B
后来一次的图,上面是B组,下面是C组,因为没有差异,所以没有设门

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发表于 2012-7-5 22:54 |只看该作者
回复 zhzxyx 的帖子. ]8 m" [  g0 N4 X
; M" V- W: l: T4 F+ X
楼主现在分到sp细胞了吗?目前遇到了和楼主一样的问题,望不吝赐教!多谢

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小小研究员

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发表于 2012-7-5 23:33 |只看该作者
回复 xubq2011 的帖子
- p4 Z6 N- l6 g% Y- C" E* E' N+ w4 ^0 \0 L
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