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[请教] BTX电转仪ECM-830电转ES细胞的参数问题 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-8-8 12:23 |只看该作者 |正序浏览 |打印
我准备做电转,使用的是BTX电转仪ECM-830电转ES细胞,但是不清楚参数问设置问题,还有使用的是4mm还是2mm的电击杯啊?好像是4mm的,有哪位大虾能指点一下,谢过。
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地板
发表于 2014-5-5 15:58 |只看该作者

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报纸
发表于 2011-8-9 12:31 |只看该作者
本帖最后由 wxl87 于 2011-8-9 12:32 编辑 % z1 D1 d+ ~9 l" N( o
, x  g/ ?/ b( d. z- V
回复 llecstem 的帖子6 F; I! j' h4 v& U, F

+ Q/ p; _& }) R( B4 ]3 I9 n我这有一篇,你看看。而且BTX网站上的参考说明也都是说用4mm的。你可以自己看一下。

Electroporation of Murine Embryonic Stem Cells A Step-by-Step Guide.pdf

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板凳
发表于 2011-8-9 11:25 |只看该作者
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& \" X$ G" O, X. U9 i/ f: G
" U3 E: |) W, Q; a& C& K: q能不能告诉我那篇文献的题目?我看到一篇文献,题目是transfection by electroporation,后面介绍了一些电转的关键参数的问题,你可以看一下

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藤椅
发表于 2011-8-8 16:12 |只看该作者
回复 llecstem 的帖子
0 Z+ [' C3 B/ P: N& M$ q: F6 {. ^) ^7 S! f0 a
文献说做ES的一般用4mm的,1mm的一般用于细菌等转染。参数还真不好弄啊,bio-rad的有一个电容参数,搞不懂啊
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沙发
发表于 2011-8-8 12:39 |只看该作者
我刚做的电转,也是要摸条件,用的和楼主同样型号的电转仪,用的是1mm电电转杯,设了六组参数,结果细胞全死了。我用到的参数最大是350V 1ms,最小的是250V 500us,觉得这些参数对1mm的电转杯来说,可能还是太大了,但也可能是细胞数量太少了,现在正找原因。这些参数都是文献报道的参数,只不过或是电转仪或是细胞类型不同,楼主可以多看一下文献,多交流吧。  N! C- j4 j+ C5 D; }8 M
老板建议我先用MEF试一下,然后再用ES
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