es诱导造血

wxyWXY

最近想做es诱导造血  想用es与op9共培养的方法  大家有谁做过吗  好的op9应该是什么形态  还没做  先请教下( K$ \4 u2 _% a
看文章 有的用照射后的op9 有的用没照射的  不知道用哪个了  谢谢大家指教

wwy551

回复 wxyWXY 的帖子0 _& i  _5 M& j; m7 b! I* G4 f6 K4 f

( U! p; c- \) _0 N我们实验室做过，不过跟OP9共培养做造血分化做得相对较少，主要都是用细胞因子或者小分子之类的做Chemical Defined造血分化。状态好的OP9就是细长的基质细胞的样子，形态均一，内容物少，没有脂肪颗粒。至于照射，目的是为了让OP9停止生长，当然也可以用丝裂霉素处理。因为OP9生长相对来说很缓慢，所以可能有人就不处理，直接用，这样对分化的ES影响也不大。大概就这样，仅供参考吧~~

wxyWXY

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3 r8 {8 ], |) Z/ {* c/ C9 i4 S
* N* H% F) P: [  G我们实验室有人用op9
6 p( t- u4 o" c  p$ J* I# R6 ]# g5 } 但师兄说 这的op9不好  因为长的很快  三天基本就长的很满了（2.8x104每孔， 六孔板） 状态到是还可以 没有脂肪滴. n/ G/ m4 A' O3 l& J
不知道你说的长的缓慢是多长时间长满？如果长的很快应该也会影响诱导的吧？谢谢啊:-)

wwy551

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! o( \* t3 S) O. n: i# [3 H% ^" D
% C, C0 u2 S& @7 C) e/ J如果不放心，就用丝裂霉素或者照射把OP9出了成Feeder，再共培养吧，这样最保险。我们之前共培养用的培养液是不含血清的，这可能也和OP9生长缓慢有关。

wxyWXY

回复 wwy551 的帖子" y" Q: R. r' f7 t) Y8 \

# O# i# `' \6 Q那可能有和培养液有关吧  我们用的是20％的血清培养 还是用照射的比较保险  谢谢啊:-)

wang66

我也在用OP9与ES共培养的方法，之前也是OP9长得太快了,结果最后很多细胞挤在一起，也有很多细胞飘起来! K0 s' I6 Y3 d2 b1 j& a' T
想请问一下，如果用丝裂霉素处理的话，一般是在生长到第几天处理呢？共培养是种ES的单个细胞还是克隆团块？2 _' s1 P' i" N