关于人胚胎干细胞培养液的问题？

wangyimei

人胚胎干细胞培养液中，bFGF的浓度是多大的？在诱导ips细胞的过程中，bFGF的浓度和所用的饲养层小鼠的品系有没有关系？

fguw

回复 wangyimei 的帖子6 X$ a0 v: ?& p

. [* h+ r* |$ B$ p final concentation, 2ng/ml,% J3 @6 ^, A. a
Feeder cell, DR4, " H2 C- u, ~2 z* T
bFGF的浓度和所用的饲养层小鼠的品系， 似乎没有看到文献说有关系，
* a( ?5 J3 w0 ~4 L: q6 G# L3 p
. v5 n, |) U* O$ b补充内容 (2011-8-9 01:53):+ n7 _& {; s: _& j5 V* e; O
bFGF的浓度，2ng/ml

yangpan521

我们用的是4ng/ml，请问浓度高低影响有多大？

wangyimei

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: \0 ^$ i7 g. z' U& D0 D) C4 t! ?$ W; a) i- X* X# C: a5 \
你好，请问一下Feeder cell, DR4,是什么意思

fguw

The Dr-4 strain of mice was prepared by the intercrossing of three different strains, one bearing resistance genes neoR and puroR a second bearing the resistance gene hygR, and a third bearing a natural deletion encompassing the Hprt gene. A series of matings incorporated all 4 drug resistance genes into the strain. See reference. ; _( v: r1 c8 k$ P

fguw

DR4的优势是做一些比较特殊的试验，比如要挑抗生素抗性克隆，( @6 g% G: h% D
如果不做，该类试验，用普通小鼠胚胎皮肤细胞就可以，有一点，对胎龄有要求，具体可以看WICELL 上操作指南，

fguw

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5 b6 Y$ a- \, D2 u
$ O$ G5 D* v2 S; d4 `4 {James thomoson lab firstly used 4ng/ml, 现在应该大多数LAB培养HESC，Human IPSC 都用4ng/ml，6 O* I( E# Q" [
我现在LAB 用2ng/ml，似乎2ng/ml够用，另外，也可以省钱，FGF应该比较贵
2 s8 C3 X% g; _: ]/ L0 p% Q' R* g
  h2 ]/ a6 B: p
+ E: m" G, u+ a