关于人胚胎干细胞培养液的问题？

wangyimei

人胚胎干细胞培养液中，bFGF的浓度是多大的？在诱导ips细胞的过程中，bFGF的浓度和所用的饲养层小鼠的品系有没有关系？

fguw

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2 Z" L1 ^0 x* R4 T/ G+ {5 q2 H: o: Z: ]" z3 _/ J& r; _
final concentation, 2ng/ml,! b4 a. B9 M1 v5 K
Feeder cell, DR4,
5 K* Z  P  }/ k" g( p3 nbFGF的浓度和所用的饲养层小鼠的品系， 似乎没有看到文献说有关系，" a9 ?2 q/ }+ c0 r5 V+ r) z

" n- H+ v! t; w% O, Y补充内容 (2011-8-9 01:53):: U) _8 }$ {1 L) j9 y9 U* }. p
bFGF的浓度，2ng/ml

yangpan521

我们用的是4ng/ml，请问浓度高低影响有多大？

wangyimei

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/ b0 d7 N) F" q: q5 A# B8 s* p0 d3 }" |7 S, f. @$ b
你好，请问一下Feeder cell, DR4,是什么意思

fguw

The Dr-4 strain of mice was prepared by the intercrossing of three different strains, one bearing resistance genes neoR and puroR a second bearing the resistance gene hygR, and a third bearing a natural deletion encompassing the Hprt gene. A series of matings incorporated all 4 drug resistance genes into the strain. See reference.
; A2 M3 \+ l, P$ B* I7 |- k  F

fguw

DR4的优势是做一些比较特殊的试验，比如要挑抗生素抗性克隆，
; T2 _$ a2 j; t如果不做，该类试验，用普通小鼠胚胎皮肤细胞就可以，有一点，对胎龄有要求，具体可以看WICELL 上操作指南，

fguw

回复 yangpan521 的帖子5 T5 F/ f9 p3 j- V9 @5 b1 J
, x: [( f; F5 [
James thomoson lab firstly used 4ng/ml, 现在应该大多数LAB培养HESC，Human IPSC 都用4ng/ml，2 N: l. o) ]! S
我现在LAB 用2ng/ml，似乎2ng/ml够用，另外，也可以省钱，FGF应该比较贵
& m8 |2 V0 |2 t0 l
6 D- C6 V. O" B4 F$ n" y3 x  S6 l$ n2 k+ w1 C" e6 e# x