关于人胚胎干细胞培养液的问题？

wangyimei

人胚胎干细胞培养液中，bFGF的浓度是多大的？在诱导ips细胞的过程中，bFGF的浓度和所用的饲养层小鼠的品系有没有关系？

fguw

回复 wangyimei 的帖子" ]7 Y5 `7 e: P/ P6 v* j7 }

4 l8 M) M+ ?- c" _. i) q5 X% l final concentation, 2ng/ml," x& Y, V$ e# H
Feeder cell, DR4,
1 I& {% W* Z& o0 a  MbFGF的浓度和所用的饲养层小鼠的品系， 似乎没有看到文献说有关系，
2 w/ _6 B/ G( V2 [. w0 x" g* L2 _7 q  E$ d  e) V  i
补充内容 (2011-8-9 01:53):
7 B5 Z; \+ p" ObFGF的浓度，2ng/ml

yangpan521

我们用的是4ng/ml，请问浓度高低影响有多大？

wangyimei

回复 fguw 的帖子) b3 N! p" e  N, T5 M
1 ~9 d/ s! |* W  y
你好，请问一下Feeder cell, DR4,是什么意思

fguw

The Dr-4 strain of mice was prepared by the intercrossing of three different strains, one bearing resistance genes neoR and puroR a second bearing the resistance gene hygR, and a third bearing a natural deletion encompassing the Hprt gene. A series of matings incorporated all 4 drug resistance genes into the strain. See reference.
7 W$ C/ m" Z" a& K3 e; H3 U9 k

fguw

DR4的优势是做一些比较特殊的试验，比如要挑抗生素抗性克隆，
: [, t: V% N1 N  e3 l9 m如果不做，该类试验，用普通小鼠胚胎皮肤细胞就可以，有一点，对胎龄有要求，具体可以看WICELL 上操作指南，

fguw

回复 yangpan521 的帖子3 T& Z% w1 h5 a6 g
  K: e5 v9 Y: ]8 ^+ q
James thomoson lab firstly used 4ng/ml, 现在应该大多数LAB培养HESC，Human IPSC 都用4ng/ml，) I& s% U# x$ Z
我现在LAB 用2ng/ml，似乎2ng/ml够用，另外，也可以省钱，FGF应该比较贵
. Z5 C/ j, U! w) l. \# m6 Z
1 I1 W  p2 c9 \3 E6 v1 P) j4 x4 v; E4 ~1 s# k