大家的肿瘤干细胞都是贴壁培养的吗?

kosmos.y

最近开始做肝癌的cancer stem cell。发现要养很多细胞才能得到那么一点细胞，累啊，分选了一万个细胞，实际数了才只有4000，求教有没有什么方法培养细胞可以获得比较多的肿瘤干细胞？
+ @7 P! V$ v  ]' E  x( s有听说可以加细胞因子使得它不贴壁，使得其悬浮培养，这样获得的细胞比较多，应该是使得细胞忘干细胞方向发展了。

oucflora

没有培养过肿瘤干细胞，但是楼主说的，通过使细胞不贴壁而获得干细胞，好像不准确哦

amosummer

悬浮培养是维持干细胞的特性，养成类似干细胞球的东西，而不是能增殖得特别快啊！其实如果你要养原代的肿瘤干细胞，只能从病例里面分离出来细胞，需要有足够量的细胞。而真正干细胞的话，生长的速度是比较慢的。而且也很少有贴壁培养肿瘤干细胞的方法吧，一般都采用悬浮无血清培养。

kosmos.y

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* K3 F# u3 K: i* Y' L
) p5 q1 }: q: f. p5 h是使细胞不贴壁从而更高效率的获得肿瘤肝细胞

kosmos.y

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+ ~% [2 N5 y: X, l2 Q- C, U8 M3 S  I6 d2 j& m& t
嗯，我是说培养肿瘤干细胞，因为一般从病理里分离出来的细胞都是贴壁培养的，不断的扩大，当到一定数目后再通过流式分选将有特定的标记的肿瘤干细胞分选出来。这样效率很低，很累。我是想说首先将贴壁的细胞通过加细胞因子将它变成悬浮的，这样最后分选的效率会高一点吗？

amosummer

回复 kosmos.y 的帖子: P1 V& d% z& A/ ~

( @# R$ {# o6 q$ P& B8 N2 f$ ~你可以试试啊！看一下培养成球后表面标记的细胞会不会多点。

daviddow

你用100mm直径的ultrlow attachment dish啊

echo

我采用的是悬浮无血清培养，确实很慢，需要耐心。

jack0811

如果是胶质瘤的话也有paper指出可以用神经干细胞贴壁培养的培养条件来贴壁培养出胶质瘤干细胞

xiaoyao85121

是培养体系的问题吧，肿瘤干细胞一般是悬浮成球生长的，这是它的特定生长状态，如果贴壁生长的话，细胞很有可能分化了，那你可以检测一下，贴壁生长的细胞肿瘤干细胞的标记基因表达会减少。