原代MEF消化

runsong

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这是很正常的，MEF原代培养简单的话就先仔细剪碎，至少剪300下，再加入大量胰酶（不要小气）37℃消化20min左右，成为粘稠透明状液体。用3倍于胰酶体积的培养液中和，直接接入培养皿里就行了。粘液里的细胞会自己迁出、贴壁的。待其贴壁后及时换液。$ e7 T+ h8 D' I3 Z6 |5 B" v1 L. T
有两点需要注意：1、要充分剪碎，2、要用充足的胰酶。7 b, B: q, `* C( K$ G( C
有两点无需注意：1、不必消化为单细胞，2、培养液里的胰酶不太影响细胞生长。（如果不放心的话可以中和后离心，弃掉一些液体，不过不要弃掉粘液，上清也弃不多）
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补充一点：我不是牛人，四楼坐板凳的才是。

runsong

回复 nibirucome 的帖子9 [2 W' {' m& W* l$ @7 N) X
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是的，但这也是无奈之举。6 @3 n4 x0 A  b$ N5 x0 t
胰酶并不适合做mef，很难消化为单细胞。选用其他的方法其他的酶效率会高几倍。

runsong

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5楼的方法应该可以，$ Q. I; K2 f. e5 E3 I# f. l
不过好像应该是0.05%的trypsin