原代MEF消化

runsong

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6 }7 |) d9 |1 H; ]这是很正常的，MEF原代培养简单的话就先仔细剪碎，至少剪300下，再加入大量胰酶（不要小气）37℃消化20min左右，成为粘稠透明状液体。用3倍于胰酶体积的培养液中和，直接接入培养皿里就行了。粘液里的细胞会自己迁出、贴壁的。待其贴壁后及时换液。
# N! m/ S- c& o0 ^4 e有两点需要注意：1、要充分剪碎，2、要用充足的胰酶。
3 Y& O  m8 [/ j有两点无需注意：1、不必消化为单细胞，2、培养液里的胰酶不太影响细胞生长。（如果不放心的话可以中和后离心，弃掉一些液体，不过不要弃掉粘液，上清也弃不多）
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补充一点：我不是牛人，四楼坐板凳的才是。

runsong

回复 nibirucome 的帖子! j& u" ~- U  T$ Y# V2 z
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是的，但这也是无奈之举。* X0 d' ~) ~. r/ e, _
胰酶并不适合做mef，很难消化为单细胞。选用其他的方法其他的酶效率会高几倍。

runsong

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: S' Q7 N8 F6 r5 _* O( @( ^8 o回复 nibirucome 的帖子; k& ?. _& n0 m1 t

$ m1 t3 S4 l8 l) u# |; ~$ m/ }" E  Q5楼的方法应该可以，
: [$ y( a; z9 k& R5 m" s, J不过好像应该是0.05%的trypsin