干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 65662|回复: 2
go

[请教] 原代MEF消化   [复制链接]

Rank: 3Rank: 3

积分
955 
威望
955  
包包
755  

热心会员 优秀会员 小小研究员 积极份子 帅哥研究员 美女研究员 金话筒 精华勋章

楼主
发表于 2011-8-15 11:54 |显示全部帖子
本帖最后由 runsong 于 2011-8-15 11:57 编辑 1 H# W9 l/ C# Y4 a
3 d7 B; G9 H/ v/ X2 {
这是很正常的,MEF原代培养简单的话就先仔细剪碎,至少剪300下,再加入大量胰酶(不要小气)37℃消化20min左右,成为粘稠透明状液体。用3倍于胰酶体积的培养液中和,直接接入培养皿里就行了。粘液里的细胞会自己迁出、贴壁的。待其贴壁后及时换液。0 `" ~$ ~) ?! j, ^9 q
有两点需要注意:1、要充分剪碎,2、要用充足的胰酶。, c. D! `. w* R+ X0 `0 W
有两点无需注意:1、不必消化为单细胞,2、培养液里的胰酶不太影响细胞生长。(如果不放心的话可以中和后离心,弃掉一些液体,不过不要弃掉粘液,上清也弃不多)
! s  l; j# C, R* i& x- J4 |
/ I. m: a/ v1 \7 W  a补充一点:我不是牛人,四楼坐板凳的才是。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 20 + 30 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 20  包包 + 30   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
955 
威望
955  
包包
755  

热心会员 优秀会员 小小研究员 积极份子 帅哥研究员 美女研究员 金话筒 精华勋章

沙发
发表于 2011-8-15 18:16 |显示全部帖子
回复 nibirucome 的帖子- o6 \# x- P& n) M

& c  _/ N8 x# y0 z是的,但这也是无奈之举。
. o- Q' j% p2 i胰酶并不适合做mef,很难消化为单细胞。选用其他的方法其他的酶效率会高几倍。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
955 
威望
955  
包包
755  

热心会员 优秀会员 小小研究员 积极份子 帅哥研究员 美女研究员 金话筒 精华勋章

藤椅
发表于 2011-8-15 18:17 |显示全部帖子
本帖最后由 runsong 于 2011-8-15 18:20 编辑
- a5 \! F% C4 s6 }& ]
4 g3 {8 Q6 Y7 k" x' f6 J( y回复 nibirucome 的帖子
1 W/ c! m# X2 o+ \% S) r& X5 K8 \& ^# Z* w& i+ Z# G
5楼的方法应该可以,
9 }' C1 n2 U0 M2 i' c5 {不过好像应该是0.05%的trypsin
‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-6-13 00:13

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.