原代MEF消化

runsong

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这是很正常的，MEF原代培养简单的话就先仔细剪碎，至少剪300下，再加入大量胰酶（不要小气）37℃消化20min左右，成为粘稠透明状液体。用3倍于胰酶体积的培养液中和，直接接入培养皿里就行了。粘液里的细胞会自己迁出、贴壁的。待其贴壁后及时换液。" C. B8 D. P9 d: U, ?( @/ e, P
有两点需要注意：1、要充分剪碎，2、要用充足的胰酶。! R' n8 J/ p! u" i  m! G
有两点无需注意：1、不必消化为单细胞，2、培养液里的胰酶不太影响细胞生长。（如果不放心的话可以中和后离心，弃掉一些液体，不过不要弃掉粘液，上清也弃不多）; J4 Q; J, C/ ]
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补充一点：我不是牛人，四楼坐板凳的才是。

runsong

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) q: v4 k! s7 _- P* J. c是的，但这也是无奈之举。
7 s) L9 d. K- r6 p) n/ T# X9 t  j胰酶并不适合做mef，很难消化为单细胞。选用其他的方法其他的酶效率会高几倍。

runsong

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( H- R- G% z/ w9 Q# ~, q
! I5 q( ?; L1 H1 T4 @& J8 @! |5楼的方法应该可以，1 T) c; U' i6 u, l
不过好像应该是0.05%的trypsin