原代MEF消化

runsong

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这是很正常的，MEF原代培养简单的话就先仔细剪碎，至少剪300下，再加入大量胰酶（不要小气）37℃消化20min左右，成为粘稠透明状液体。用3倍于胰酶体积的培养液中和，直接接入培养皿里就行了。粘液里的细胞会自己迁出、贴壁的。待其贴壁后及时换液。0 `" ~$ ~) ?! j, ^9 q
有两点需要注意：1、要充分剪碎，2、要用充足的胰酶。, c. D! `. w* R+ X0 `0 W
有两点无需注意：1、不必消化为单细胞，2、培养液里的胰酶不太影响细胞生长。（如果不放心的话可以中和后离心，弃掉一些液体，不过不要弃掉粘液，上清也弃不多）
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/ I. m: a/ v1 \7 W  a补充一点：我不是牛人，四楼坐板凳的才是。

runsong

回复 nibirucome 的帖子- o6 \# x- P& n) M

& c  _/ N8 x# y0 z是的，但这也是无奈之举。
. o- Q' j% p2 i胰酶并不适合做mef，很难消化为单细胞。选用其他的方法其他的酶效率会高几倍。

runsong

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5楼的方法应该可以，
9 }' C1 n2 U0 M2 i' c5 {不过好像应该是0.05%的trypsin