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扩大培养,摇菌到底要摇到什么程度 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-8-18 07:26 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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这几天真的是很不顺,不知道为什么,前几天一直做转化,结果板子除了问题,菌一直长得不好;近几天提质粒,结果昨天做的时候不小心碰倒了架子,所有做的都白费了,我又重新挑菌摇菌,结果昨天晚上摇菌的时候一个东西从摇床上掉下去了,卡主了摇床,不知道摇了几个小时,也没见菌液太浑,所以想问一下,摇菌到底要到什么程度就行了?一般说是14~16个小时,由于不知道摇床什么时候停的,所以现在我不能从时间上判断摇菌程度,我想问一下培养基浑浊到什么程度就说明菌摇好了,可以提质粒了?
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发表于 2011-8-18 22:36 |只看该作者
huangcong1988 发表于 2011-8-18 11:32 ; G8 I, v8 L' o% k( \1 c& x
回复 xiangchou812 的帖子
( b3 g9 ]) a5 B9 a5 ?7 J& _! V" t
' [* k6 T+ B( L+ W# K时间长了长杂菌

8 G5 d) I( ]$ B( M6 k) p9 [时间长了就长杂菌么?我觉得不是这样的,而是像平板里抗性克隆旁边长出的卫星菌落一样。
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发表于 2011-8-18 11:35 |只看该作者
回复 yangpan521 的帖子8 [! a/ i( A; g: ^) N

1 w' A0 A: D0 O7 u( x9 P主要是浑浊到什么程度,因为不能只摇一下就行吧?不能5oml只提出5ml的量吧?

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发表于 2011-8-18 11:34 |只看该作者
回复 rain2402 的帖子
9 o, h. l& s9 V* ]5 T1 q; |* s) ]- @4 x% m8 A: C/ F5 d% Z
我是50ml菌液

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发表于 2011-8-18 11:33 |只看该作者
回复 amosummer 的帖子% A6 E# f* z: r3 W( i
# h+ c1 {, W$ r$ A. T9 X
转染细胞用的质粒

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发表于 2011-8-18 11:32 |只看该作者
回复 xiangchou812 的帖子) N3 C$ @: B, ^  e. G3 y

4 n- Q: ~8 V% D/ F3 S+ N时间长了长杂菌

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发表于 2011-8-18 11:32 |只看该作者
回复 懵懂干细胞 的帖子
. r* u9 z) ?+ _- Z
. F- H8 v7 s9 O! b  Q谢谢,非常感谢

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发表于 2011-8-18 10:14 |只看该作者
不用管摇了多长时间,继续培养就行。人家说的14-16h,我想一是怕抗生素失效引起杂菌生长,二是怕细菌培养太久给老化了,影响质粒产量。

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发表于 2011-8-18 10:14 |只看该作者
不用管摇了多长时间,继续培养就行。人家说的14-16h,我想一是怕抗生素失效引起杂菌生长,二是怕细菌培养太久给老化了。
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地板
发表于 2011-8-18 09:29 |只看该作者
LZ你的问题不是你不知道菌摇到什么程度吧,是你最近运气不好,都不敢相信自己的判断了吧!
$ H0 E" u8 M+ @- c) [没关系的,相信自己!
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