microRNA过表达

ghfvcat

请问各位有没有做过microRNA过表达？用的哪家公司的产品？

amosummer

invitrogen的, pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR，自带荧光

fwyou

如果用siRNA 那这个载体是否可用呢？ amosummer。。。求教

刘艳85

感觉应该不可以吧

runsong

http://www.stemcell8.cn/thread-44826-1-2.html

rain2402

你要是自己做的话，载体用2楼所说的那个invitrogen的, pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR，就行，如果公司给予构建载体，你可以找上海吉玛。。。（我不是做广告的啊）。。但是一般都自己构建就行了。

wolf1978

fwyou 发表于 2011-8-18 10:44
( g* A+ v8 r* D6 E如果用siRNA 那这个载体是否可用呢？ amosummer。。。求教

5 I; c% E& v0 Q1 ^; P) R4 i
这个应当是可以的，而且从原理上会优于原有的一些载体，因为此载体以miRNA生成的骨架来生成siRNA，避免了既往siRNA载体的一些副作用，比如，siRNA载体可能会通过对Dicer的竞争饱和影响到内源性miRNA的生成。

wolf1978

rain2402 发表于 2011-8-18 13:25 - N" g( {0 g/ M$ j1 ?) s3 \- S  ?) B
你要是自己做的话，载体用2楼所说的那个invitrogen的, pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR，就行，如果公司给予构建载体 ...

- [% L$ s4 S* w: `6 n. x4 w
自己做好了，一般的CMV真核表达载体直接克隆就行了，不是很麻烦的！

xiaoyao85121

我个人不推荐吉玛，之前在他们公司买了一个microRNA干扰质粒，做了一点效果都没有，催款到是很积极。我建议还是自己构建，可以用PCR的方法从基因组中扩增出序列，装到载体中，即可以质粒转染，又可以包装病毒。