神经球贴壁分化

angelyannan

本人在培养E14.5days小鼠皮层神经干细胞，从第一代开始神经球在接种第二天就开始贴壁，接种三四天后神经球就漂浮起来了，已经有三代细胞都是这种状态了。不过细胞的增殖能力好像没有改变。不知道其内在发生了什么变化。希望大虾们指点一下神经球为什么会有这种情况？

yinjiqingqq

回复 angelyannan 的帖子* D- R5 o0 h$ C0 b; X' F8 d, a! \* i$ T

9 d8 Y* l1 t  O7 ?2 ^: \! [貌似神经球就是悬浮培养的，没有问题。建议你查一下其他的文献。

413079683

不要要铺PLO或者PDL增强贴壁性的吗？

angelyannan

回复 413079683 的帖子
, z3 ]" G! w4 W
9 i  u  a7 p. F  Z& M神经干细胞前期一般都是悬浮培养的。只是我的在培养过程中神经球会贴壁，所以我提出疑问，你所说的处理是我的后期实验操作。我是用PDL和laminin处理coverslips 的。

413079683

哦，明白了，刚一开始，细胞少的时候，是会贴壁的，慢慢的细胞多了成球了就会悬浮的，是这样的，我也遇到过

413079683

回复 angelyannan 的帖子
  {3 Y' r% J& J$ k! i8 A3 g' g6 j( P, {7 o- h9 p! c' ]) P2 Z% L
你们养的胎鼠还是成年的？多少天的？取得什么部位？培养基是什么成分？( L! W2 R1 @: p) e$ y
我养的是E17海马神经干细胞，但是最近老是感觉不对。是不是我的培养基（DMEM/F12，200x B27，100X N2，10ng/ml EGF和bFGF）有问题？
" F$ f) V% L  w6 K9 H还有，你们用的神经球，一般是第几代用于实验？是不是一般P0都不做实验用的？

413079683

回复 angelyannan 的帖子
1 \+ H! O8 s6 g9 P# g: o2 e4 Q* h; m
4 R) M  y5 h9 \6 `哦，明白了，刚一开始，细胞少的时候，是会贴壁的，慢慢的细胞多了成球了就会悬浮的，是这样的，我也遇到过

angelyannan

回复 413079683 的帖子2 v$ @8 r2 X, {; j
4 Z* N( D: Y% s2 E: u+ k
E14.5days,的小鼠，皮层，培养基（DMEM/F12, 2％B27,20ng/ml EGF和20ng/ml bFGF，50U的双抗）。一般1-4代用于实验。

413079683

回复 angelyannan 的帖子
! h1 n" n/ ~& M% d8 i9 d0 {' k1 z9 U* Y' S  M, S( c
那估计是我的培养基和用于实验的神经球代数过早的原因了。我是上海药物所的，你在哪做实验？方便留个QQ不？有问题了可以交流下，

coffee.cat105

回复 angelyannan 的帖子
- `8 c6 v& P+ D! q
1 ]% L0 |4 Y' R5 \. J7 G( K( I贴成这个样子的话就是分化了，如果不是，应该就没有问题，还有，分化了的细胞也是一晃就下来了，但是它就不会回到神经球里了，就像个尾巴一样在下面一晃一晃的…………