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[讨论] 细胞冻存再复苏,发现形态同以前不一样了,怎么办? [复制链接]

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楼主
发表于 2011-8-24 14:50 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 jiojoo 于 2011-8-24 14:52 编辑
2 f; P- j4 a# R/ z
- V/ ^; v7 s9 [  @RT
* \* q$ W0 p2 B" H" v" A细胞是畸胎瘤细胞
+ l! V+ G: {- m5 z2 Y* l3 J% V看图,以前的细胞:
6 G* s/ N: O6 _+ @( i( B9 [ a.jpg # o8 j9 A, y4 ^  M  s% N6 [
复苏后的细胞:
9 q5 c( y  T) ?! e0 Y; X b.jpg
' o# \# s) n% v' B: B) }1 S9 s- `
4 T/ P' l: C0 q; R  D& q感觉细胞怎么那么多细丝状的,那是伪足吗?以前是基本没有的, F* V2 w' p" T% l
现在的细胞,看起来好像神经细胞一样,那么多树突一样的东西
* B1 H4 [8 o5 w2 z! [4 k  f9 W2 l. s, Q* h2 N: o$ Y
复苏后细胞死了大半,换液两天后,培养液非旦不变黄,居然还比刚加入时更紫了,这是怎么回事?
0 J& C1 Q: M. A0 s: ?9 p2 Z平时养的话,一天就开始变黄了的
7 T0 ^- P4 ]4 V* G; c2 k* ~
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沙发
发表于 2011-8-24 15:18 |只看该作者
楼主冻存时加培养基了吗
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藤椅
发表于 2011-8-24 16:38 |只看该作者
回复 amberma 的帖子
: f5 e, e6 j1 g
1 G* \' t7 h, V- A8 ?冻存液是2倍浓度FBS的培养基加10%的DMSO
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发表于 2011-8-24 17:07 |只看该作者
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颜色变紫色是因为培养液的pH呈碱性了,看看二氧化碳培养箱供气是否正常,或者是被霉菌污染。
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发表于 2011-8-24 17:44 |只看该作者
可能培养基有问题了~
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发表于 2011-8-24 17:52 |只看该作者
培养液变成紫色,pH值升高了,原因,一方面是细胞刚复苏,细胞还没有完全恢复到旺盛的增殖状态,另外,如果你是用二氧化碳培养箱,那么可能没有二氧化碳了,如果只是普通的生化培养箱,可能是培养瓶密封性不好。仔细观察,你冻存前得细胞有很多跟复苏后细胞形态类似的。细胞形态的变化可能跟培养液pH值升高有关系。
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发表于 2011-8-24 19:12 |只看该作者
培养箱上显示的5.0,没有问题
  I* I9 z' M2 b0 F! z6 D0 j其它细胞还算正常

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发表于 2011-8-25 08:38 |只看该作者
回复 jiojoo 的帖子. W' S6 Z. Z$ C5 H9 s; u

/ T% u$ t( D) i: M似乎楼主血清加的有点少 建议试下  培养基:血清:DMSO=5:4:1 的比例冻存
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