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[讨论] 细胞冻存再复苏,发现形态同以前不一样了,怎么办? [复制链接]

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楼主
发表于 2011-8-24 14:50 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 jiojoo 于 2011-8-24 14:52 编辑 ; v3 r2 ]! F& V2 |0 I6 P

" [2 @1 v7 D: q* W  }RT
2 W+ s6 w# `$ Q. _" h) N细胞是畸胎瘤细胞* N: @1 u7 X, R; H  B: Y# @
看图,以前的细胞:
9 T" A. \/ Y! s# @7 \. p a.jpg
- |: g/ ?, J1 S0 l: a" d7 r复苏后的细胞:
. Q( g1 X# s1 J* @/ ~ b.jpg
$ _" J3 G( i" _, M9 }2 u* D3 @5 l$ d+ g) \- ^4 ~
感觉细胞怎么那么多细丝状的,那是伪足吗?以前是基本没有的
* p& v. P4 N/ X; S8 P  c$ q现在的细胞,看起来好像神经细胞一样,那么多树突一样的东西4 H1 n. n- U: t- G) z4 v# B
$ _; r3 U! L( J# [3 @, c( f0 V
复苏后细胞死了大半,换液两天后,培养液非旦不变黄,居然还比刚加入时更紫了,这是怎么回事?
$ U( ]% Z  V9 [( b& ?平时养的话,一天就开始变黄了的: M. [" X; q6 Y6 v: B' r* h0 W& v
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发表于 2011-8-24 15:18 |只看该作者
楼主冻存时加培养基了吗
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藤椅
发表于 2011-8-24 16:38 |只看该作者
回复 amberma 的帖子5 \# o: L8 x! I" y5 z
: D) z# X0 i+ W
冻存液是2倍浓度FBS的培养基加10%的DMSO
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发表于 2011-8-24 17:07 |只看该作者
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颜色变紫色是因为培养液的pH呈碱性了,看看二氧化碳培养箱供气是否正常,或者是被霉菌污染。
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发表于 2011-8-24 17:44 |只看该作者
可能培养基有问题了~
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发表于 2011-8-24 17:52 |只看该作者
培养液变成紫色,pH值升高了,原因,一方面是细胞刚复苏,细胞还没有完全恢复到旺盛的增殖状态,另外,如果你是用二氧化碳培养箱,那么可能没有二氧化碳了,如果只是普通的生化培养箱,可能是培养瓶密封性不好。仔细观察,你冻存前得细胞有很多跟复苏后细胞形态类似的。细胞形态的变化可能跟培养液pH值升高有关系。
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发表于 2011-8-24 19:12 |只看该作者
培养箱上显示的5.0,没有问题
5 w, c# ~, S5 ^4 E5 y其它细胞还算正常

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发表于 2011-8-25 08:38 |只看该作者
回复 jiojoo 的帖子% ?1 P* e) q/ L% Q

, N2 H; m  i8 h" R' X6 u0 Z( H似乎楼主血清加的有点少 建议试下  培养基:血清:DMSO=5:4:1 的比例冻存
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