iPS培养的一个问题

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iPS买来传了几代后，克隆感觉很薄，特别是中间类似脱落了很多细胞，严重的克隆就是一个圈状，中间无细胞了。细胞总会出现些漂浮的。这是什么问题呢？如果分化能通过形态简单辨别出来吗？

sunny2829

你买的是哪种病毒转染的，4F吗？9 ~8 |3 j/ I5 }9 ]5 W
克隆和饲养层同一个平面的，只要克隆细胞致密，核质比大，边缘清晰，就没问题。至于中间类似脱落了很多细胞，有可能是克隆状态不佳吧，传代时去掉此类细胞便可。
- V  z- x9 j: f6 Y. A% K* q克隆中间出现圈状？是不是你机械法传代啊？然后再小克隆中间刮个洞？与ES相比，差异还是比较大的。  f% I1 @' B; l* U( \2 h
分化是可以通过形态分辨的。未分化克隆细胞致密，核质比大，边缘清晰；当细胞变大，细胞形态又圆变成其他形状，核质比小等等，就说明已经分化了~~~
4 W) ?+ \* ]9 }5 ]( F9 F

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边缘不太清晰，这是我最担心的

wangshumin12311

有没有用feeder养，多传几代，拍照看看，iPS细胞复苏后分化比较严重，多传几代会好些！' N1 F. z7 S  F3 E6 r

) N3 J2 N0 `2 U( g  ]0 N1 M5 g补充内容 (2011-9-1 14:41):
9 K: I1 n- a: Q* l+ q& ^9 M还有麻烦写清楚是人还是鼠+ i1 j' W, D3 @: C

sunny2829

回复 573639471 的帖子) B4 ~3 D+ R- \

$ R8 @8 C1 Z" T- o- E拍个照片看看吧~~~