人脂肪干细胞培养 - 脂肪干细胞专区干细胞之家



免疫细胞治疗专区	欢迎关注干细胞微信公众号

返回列表

查看: 29245\|回复: 6	go 人脂肪干细胞培养 [复制链接]

llhxq09

新手上路

Rank: 1

积分: 36
威望: 36
包包: 710

楼主

发表于 2011-9-7 22:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

我取人大网膜13ml，0.1%Ⅰ型胶原酶在培养箱内消化2:30h,之后过滤，1500r离心，接种于25cm2的瓶子，10%FBS/低糖DMEM（F-12也用过）培养，但是贴壁细胞很少，养不起来。有人知道怎么回事吗？以前用癌症患者大网膜，取40ml可以养出来，不知道是不是样本量太少了？急！

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

Rank: 2

积分: 158
威望: 158
包包: 831

沙发

发表于 2011-9-9 08:24 |只看该作者

是不是消化时间太长了呀？我们做鼠的最多消化1个小时。

已有 2 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 10	欢迎参与讨论
dc1055	+ 1	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3 包包 + 15 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

dc1055

版主

Rank: 7 Rank: 7 Rank: 7

积分: 186
威望: 186
包包: 1482

优秀版主

藤椅

发表于 2011-9-9 10:12 |只看该作者

建议：& g9 w* t: {$ ]0 _
1.样本量加大；
2.消化时间减少；
3.离心速度减小；; H2 y6 O: a ~8 v4 S# c. ?
4.血清量加大

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 10	+ 20	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10 包包 + 20 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

llhxq09

新手上路

Rank: 1

积分: 36
威望: 36
包包: 710

板凳

发表于 2011-9-9 22:02 |只看该作者

谢谢，我再试试吧，有的人说5ml皮下脂肪就能培养出，不知道是真的能吗？我现在标本也不好取，哎

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 1	+ 5	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1 包包 + 5 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

都市青蛙

注册会员

Rank: 2

积分: 158
威望: 158
包包: 1395

积极份子

报纸

发表于 2011-9-14 12:53 |只看该作者

回复 llhxq09 的帖子7 Q% I& g" W, \; ~
- h) x* V( L6 S7 z0 z( Y; W' R# [( C
人的需要量是比鼠的多些，但是一般10ml都能养的不错，消化的时间40min成糊状就好了，你是不是消化的太过，离心用1000g就可以了# J8 J2 O- d6 f& t4 X
种的密度可以先大点4 m- O; t) {7 ]3 J6 f! N" B% ]2 u1 _